Method for preparing trimeric proteins

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 15/00 (2006.01) C07K 14/005 (2006.01) C07K 14/08 (2006.01) C07K 14/11 (2006.01) C07K 14/115 (2006.01) C07K 14/15 (2006.01) C07K 14/525 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12P 21/02 (2006.01)

Patent

CA 2621764

The present invention relates to a method of preparing a trimeric protein comprising culturing a host cell transformed or transfected with an expression vector encoding a fusion protein comprising a ZymoZipper (ZZ) domain and a heterologous protein. In one embodiment, the heterologous protein is a membrane protein, the portion of the heterologous protein that included in the fusion protein is the extracellular domain of that protein, and the resulting fusion protein is soluble. In another embodiment of the present invention, the ZZ domain is derived from the transmembrane (TM) subunit of a virus envelope protein or another heptad repeat containing gene of a virus genome. The method can be used to produced homo- and hetero-trimeric proteins. The present invention also encompasses DNA molecules, expression vectors, and host cells used in the present method and fusion proteins produced by the present method.

L'invention porte sur un procédé de préparation d'une protéine trimérisée consistant à cultiver une cellule hôte transformée ou transfectée avec un vecteur d'expression codant pour une protéine de fusion comprenant un domaine ZymoZipper (ZZ) et une protéine hétérologue. Dans une exécution, la protéine hétérologue est une protéine membranaire et sa partie inclue dans la protéine de fusion est en est le domaine extracellulaire. Dans une autre exécution, le domaine ZZ dérive de la sous-unité transmembranaire (TM) d'une protéine enveloppe de virus, ou d'un autre gène à hepta répétition de génome viral. Le procédé peut servir à produire des trimères homo et hétéro de protéines. L'invention englobe également les molécules d'ADN, les vecteurs d'expression et les cellules hôtes, utilisés dans ledit procédé, et les protéines de fusion produites par ledit procédé.

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