Method to detect bacteria

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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Details

C12Q 1/70 (2006.01) C12Q 1/04 (2006.01) C12Q 1/06 (2006.01)

Patent

CA 2240352

The present invention relates to a method for enhancing the time of response of an assay for a first bacterium, characterised in that: a) the said first bacterium is exposed to infection by phage particles to which the said first bacterium is permissive; b) the infected bacterium is treated to in-activate exogenous phage particles; c) the treated bacterium is cultivated in the presence of a second bacterium which is permissive to said phage or its replicand and which has a doubling rate greater than the effective doubling rate of the first bacterium; and d) assessing the extent of plaque formation and/or of second bacterium growth in the cultivated second bacterium cells. The method of the invention can be used to assess the presence of first bacterium in a sample, notably where the first bacterium is a slow growing bacterium, especially Mycobacterium tuberculosis, where the method of the invention enables an operator to detect the presence of low amounts of the bacterium in a sample within days instead of the weeks required with conventional bacterial cultivation techniques. The invention can also be used to assess the effect of a drug or other treatment on a bacterium or of a virus. The invention also provides a diagnostic kit for use in the method of the invention.

La présente invention concerne un procédé destiné à améliorer le temps de réponse d'un titrage d'une première bactérie et caractérisé en ce que: a) on expose la première bactérie à une infection par des particules d'un phage à l'égard duquel la bactérie est permissive; b) on traite la bactérie infectée afin d'inactiver dans celle-ci des particules du phage exogène; c) on cultive la bactérie traitée en présence d'une seconde bactérie, laquelle est permissive à l'égard dudit phage ou du réplicand de celui-ci, et possède une vitesse de duplication supérieure à celle de la première bactérie; et d) on évalue l'étendue de la formation de plaques et/ou de la croissance de la seconde bactérie dans les cellules de la seconde bactérie cultivée. On peut utiliser le procédé selon l'invention pour évaluer la présence d'une première bactérie dans un échantillon, spécialement lorsque cette première bactérie est une bactérie à croissance lente, notamment <u>Mycobacterium tuberculosis</u>, ce procédé permettant à un opérateur de détecter la présence de petites quantités de la bactérie dans un échantillon en quelques jours au lieu des semaines requises avec des techniques de culture bactérienne classiques. On peut également utiliser l'invention pour évaluer l'effet d'un médicament ou d'un autre traitement sur une bactérie, ou bien un virus. L'invention décrit encore une trousse de diagnostic, utile dans le procédé décrit.

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