C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/82 (2006.01) A01H 5/00 (2006.01) C07K 14/415 (2006.01) C12N 15/29 (2006.01)
Patent
CA 2422487
Compositions and methods for inhibiting the cellular mismatch repair system in a plant host cell are provided. Compositions include the cDNA and amino acid sequence of a rice MLH1 ortholog. The nucleic acid molecules and proteins of the invention find use in increasing the efficiency of targeted gene mutation and homologous recombination in plants via inhibition of the plant cellular mismatch repair system. The plant cellular mismatch repair system is inhibited through the use of transposon tagging of a MLH1 gene, sense- and antisense- suppression of a MLH1 gene, antibody binding to a MLH1 polypeptide or variant polypeptide, targeted mutagenesis of specific amino acid residues of a plant MLH1 gene, and competition with a mismatch repair impaired MLH1 polypeptide through transgeneic over-expression of the impaired polypeptide. Also provided are transformed plant cells, plant tissues, plants, and seeds. Additional methods that are provided include the detection of as little as one base pair mismatch in a DNA duplex and the generation of plants with reversible male sterility for applications in hybrid generation.
L'invention concerne des compositions et des procédés pour inhiber le système de réparation du mésappariement cellulaire dans une cellule hôte d'une plante. Ces compositions comprennent l'ADNc et la séquence d'acides aminés d'un orthologue MLH1 du riz. Les molécules d'acide nucléique et les protéines selon l'invention permettent d'augmenter l'efficacité de la mutation du gène ciblé et la recombinaison homologue dans des plantes par l'inhibition du système de réparation du mésappariement cellulaire. Ce système est inhibé par l'utilisation du transposon marquant un gène MLH1, la suppression sens et anti-sens d'un gène MLH1, la liaison de l'anticorps à un polypeptide MLH1 ou un polypeptide variant, la mutagénèse ciblée de résidus d'acides aminés spécifiques d'un gène MLH1 de plante, et la compétition avec un polypeptide MLH1 présentant un défaut par le système de réparation du mésappariement, par sur-expression transgénique du polypeptide ayant le défaut. L'invention traite aussi de cellules de plantes transformées, de tissus de plantes, de plantes et de graines. L'invention a aussi pour objet d'autres procédés qui consistent à détecter un mésappariement de paires de bases dans un duplex d'ADN et à générer des plantes présentant une stérilité mâle réversible en vue d'applications à la génération d'hybrides.
Pioneer Hi-Bred International Inc.
Torys Llp
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-2038540