Sample preparation method incorporating an alkaline shock

Details Sample preparation method incorporating an alkaline shock Sample preparation method incorporating an alkaline shock

C - Chemistry, Metallurgy

12

N

C12N 15/10 (2006.01)

Patent

CA 2597319

Method of preparing a biological sample appropriate for use in a subsequent in vitro nucleic acid amplification reaction. The method involves a rapid, transient exposure to alkaline conditions which can be achieved by mixing an alkaline solution with a pH-buffered solution that includes a detergent and the biological sample to be tested for the presence of particular nucleic acid species using in vitro amplification. The invented method advantageously can improve detection of some target nucleic acids without substantially compromising detectability of others. The method is particularly useful for simultaneously preparing RNA and DNA templates that can be used in multiplex amplification reactions.

L'invention concerne un procédé permettant de préparer un échantillon biologique destiné à être utilisé ultérieurement dans une réaction d'amplification d'acide nucléique in vitro. Ce procédé comprend une exposition transitoire rapide à des conditions alcalines, qui peut être réalisée par mélange d'une solution alcaline avec une solution à pH tamponné qui contient un détergent, et de l'échantillon biologique à analyser, dans lequel la présence d'une espèce particulière d'acide nucléique est recherchée par amplification in vitro. Le procédé décrit permet d'améliorer la détection de certains acides nucléiques cible sans réduire de manière notable la détectabilité des autres acides nucléiques. Ce procédé est particulièrement indiqué pour la préparation simultanée de matrices d'ARN et d'ADN qui peuvent être utilisées dans des réactions d'amplification multiplex.

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