Skin equivalent culture

Details Skin equivalent culture Skin equivalent culture

C - Chemistry, Metallurgy

12

N

C12N 5/077 (2010.01) C12N 5/07 (2010.01) A61K 35/36 (2006.01) A61L 27/60 (2006.01) A61P 17/02 (2006.01) C12P 21/00 (2006.01) C07K 14/78 (2006.01)

Patent

CA 2601499

Methods of forming soft connective tissue compositions such as skin equivalents, compositions made by the methods and their uses. In particular, a method of forming a connective tissue equivalent, comprising the steps of: (i) incubating collagen-producing cells in or on a support matrix; (ii) inducing and/or enhancing collagen production by the collagen-producing cells to form a collagenous construct and degradation and replacement of the support matrix; (iii) freeze-drying the construct; and (iv) re-populating the freeze-dried construct with collagen-producing cells and/or epithelial cells and/or endothelial cells and/or mesenchymal cells, thereby forming a connective tissue equivalent, wherein: (a) the collagen-producing cells are substantially fibroblasts; for example human neonatal dermal fibroblasts; (b) the support matrix is a provisional support matrix in which the support matrix is a fibrin matrix, for example formed by thrombin-mediated polymerisation of fibrinogen; and (c) as a result of the collagen production by the collagen-producing cells the provisional fibrin support matrix is digested by the cells and is replaced by collagen, thereby essentially replacing the provisional fibrin matrix with a collagen matrix synthesised in situ by the cells.

L'invention concerne des procédés pour former des compositions de tissus conjonctifs mous, par exemple des équivalents cutanés, des compositions obtenues selon lesdits procédés ainsi que l'utilisation de ces compositions. L'invention concerne en particulier un procédé pour former un équivalent de tissu conjonctif comprenant les étapes consistant à: (i) incuber des cellules produisant du collagène dans ou sur une matrice de support; (ii) induire et/ou stimuler la production de collagène par lesdites cellules pour former un collagène de synthèse et la dégradation et le remplacement de la matrice de support; (iii) lyophiliser le produit de synthèse; et (iv) repeupler le produit de synthèse lyophilisé avec des cellules produisant du collagène et/ou des cellules épithéliales et/ou des cellules endothéliales et/ou des cellules mésenchymateuses, pour former ainsi un équivalent de tissu conjonctif. Selon l'invention, (a) les cellules produisant du collagène sont essentiellement des fibroblastes; (b) la matrice de support est une matrice de support provisoire dans laquelle la matrice de support est une matrice de fibrine; et (c) la production de collagène par les cellules produisant du collagène entraîne la digestion de la matrice de support de fibrine provisoire par les cellules et son remplacement par le collagène, la matrice de fibrine provisoire étant essentiellement remplacée par une matrice de collagène synthétisée in situ par les cellules.

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