Instrument for monitoring polymerase chain reaction of dna

G - Physics – 01 – N

Patent

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G01N 21/64 (2006.01) B01L 7/00 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) G01N 21/25 (2006.01)

Patent

CA 2328609

An optical instrument monitors PCR replication of DNA in a reaction apparatus having a temperature cycled block with vials of reaction ingredients including dye that fluoresces in presence of double-stranded DNA. A beam splitter passes an excitation beam to the vials to fluoresce the dye. An emission beam from the dye is passed by the beam splitter to a CCD detector from which a processor computes DNA concentration. A reference strip with a plurality of reference emitters emit reference beams of different intensity, from which the processor selects an optimum emitter for compensating for drift. Exposure time is automatically adjusted for keeping within optimum dynamic ranges of the CCD and processor. A module of the beam splitter and associated optical filters is associated with selected dye, and is replaceable for different dyes.

Un instrument optique surveille la réplication d'ADN par PCR dans un appareil de réaction équipé d'un bloc à cycle thermique comportant des fioles d'ingrédients de réaction et notamment du colorant qui devient fluorescent en présence d'ADN double brin. Un séparateur de faisceaux transmet un faisceau d'excitation aux fioles, de façon à rendre le colorant fluorescent. Ce séparateur de faisceaux transmet un faisceau d'émission du colorant à un détecteur du type dispositif à couplage de charge, à partir duquel un processeur calcule la concentration d'ADN. Une bande de référence comportant une pluralité d'émetteurs de référence émet des faisceaux de référence d'intensité différente, parmi lesquels le processeur choisit un émetteur optimal afin de corriger les écarts. Le temps d'exposition est automatiquement corrigé, de façon à rester dans les fourchettes dynamiques optimales du type dispositif à couplage de charge et du processeur. Un module du séparateur de faisceaux et des filtres optiques correspondants est associé à un colorant choisi et peut remplacer différents colorants.

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