Site-targeted transformation using amplification vectors

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

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C12N 15/82 (2006.01) A01H 5/00 (2006.01) A01H 5/10 (2006.01) C12N 5/14 (2006.01)

Patent

CA 2442254

A process of causing a targeted integration of DNA of interest into a plynt cell nuclear genome, comprising; i) providing plant cells with an amplification vector, or a precursor thereof, capable of autonomous replication in plant cells, said vector comprising; a) DNA sequence(s) encoding an origin of replication functional in plant cells, b) DNA sequence(s) necessary for site-specific and/or homologous recombination between the vector and a host nuclear DNA, and c) optionally, further DNA of interest; ii) optionally providing conditions that facilitate vector amplification and/or cell to cell movement and/or site-specific and/or homologous reconbination, and iii) selecting cells having undergone recombination at a predetermined site in the plant nuclear DNA.

La présente invention concerne un procédé permettant de causer une intégration ciblée d'ADN d'intérêt dans un génome nucléaire de cellule végétale, comprenant les étapes consistant : i) à utiliser des cellules végétales présentant un vecteur d'amplification, ou un précurseur dudit vecteur, pouvant se répliquer de manière autonome dans des cellules végétales, ledit vecteur comprenant : a) une/séquence(s) d'ADN codant une origine de réplication fonctionnelle dans les cellules végétales, b) une/des séquence(s) d'ADN nécessaire(s) à la recombinaison spécifique à un site et/ou homologue entre le vecteur et un ADN nucléaire hôte, et c) éventuellement, un autre ADN d'intérêt; II) éventuellement à créer des conditions qui facilitent l'amplification du vecteur et/ou le mouvement de cellule à cellule et/ou la recombinaison spécifique à un site ou homologue, et III) à sélectionner des cellules ayant subi une recombinaison sur un site prédéterminé dans l'ADN nucléaire végétal.

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