Multiblot kinase analysis

G - Physics – 01 – N

Patent

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Details

G01N 33/573 (2006.01) C12Q 1/48 (2006.01)

Patent

CA 2388825

This invention provides a method for detection of multiple kinases or multiple kinase substrates, whereby the presence and phosphorylation state of a large number kinases and/or kinase substrate proteins may be tracked in a single sample electrophoretically separating in one dimension, proteins in a sample to be tested for kinase or kinase substrate content; to produce an array of proteins so separated contacting the array with two or more antibodies selected from anti-kinase and anti-kinase substrate antibodies; and, detecting the presence of said antibodies bound to kinases or kinase substrate moieties in the array. This method may also comprise recording one or more values representative of a location for each of said detected antibodies bound to proteins in the array indicative of a location of a kinase or kinase substrate in the array.

L'invention concerne un procédé de détection de plusieurs kinases, ou de plusieurs substrats de kinases, consistant à suivre la présence et l'état de phosphorylation d'un grand nombre de kinases et/ou de protéines de substrats de kinases dans un échantillon individuel, par séparation électrophorétique en une dimension de protéines, dans un échantillon devant être testé quand à son contenu en kinases ou en substrats de kinases. Pour produire un réseau de protéines ainsi séparées, le réseau est mis en contact avec au moins deux anticorps sélectionnés parmi les anticorps anti-kinase et les anticorps de substrats anti-kinase, et la présence desdits anticorps liés à des kinases ou des groupes fonctionnels de substrats de kinases dans le réseau est détectée. Ce procédé peut également consister à enregistrer une ou plusieurs valeurs représentatives d'une position de chacun desdits anticorps détectés liés à des protéines dans le réseau, cette position étant caractéristique d'une position d'une kinase ou d'un substrat de kinase dans le réseau.

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Profile ID: LFCA-PAI-O-2087715

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