A device and method for seed-train expansion of mammalian cells

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 5/071 (2010.01) C12M 1/26 (2006.01) C12M 1/34 (2006.01) C12M 1/36 (2006.01) C12M 3/02 (2006.01) C12N 5/02 (2006.01)

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CA 2431230

A device and method for seed-train expansion of a source of mammalian cells and their use in production of proteins expressed by the cells comprising the use of a dedicated inoculation bioreactor for expanding the cells prior to the tranfer to a production bioreactor is disclosed. The novel inoculation bioreactor is designed to facilitate an improved method of mammalian cell seed- train expansion, and is distinguished by the presence of an "inoculation well" wich communicates with the interior of the bioreactor and which facilitates the growth of mammalian cells for commercial seed-train expansion. The method comprises adding the cryopreserved cells to media within the inoculation well of the inoculation bioreactor, enabling the cells to grow to a predeterminated concentration within the inoculation well by monitoring and adjusting the condition of the media and environment, and thereafter incrementally increasing the volume of the media within the reactor so that optimal cell growth is maintained.

La présente invention concerne un dispositif et un procédé d'expansion de groupes de semences d'une source de cellules de mammifères et l'utilisation de ces derniers dans la production de protéines exprimées par les cellules dans laquelle on utilise un bioréacteur spécialisé pour l'inoculation afin de développer les cellules avant de les transférer dans un bioréacteur de production. Le nouveau bioréacteur employé pour l'inoculation est conçu pour permettre de mettre en oeuvre un procédé amélioré d'expansion de groupes de semences de cellules de mammifères et se distingue par la présence d'un 'puits d'inoculation'' qui communique avec l'intérieur du bioréacteur et qui favorise la croissance des cellules de mammifères pour permettre l'expansion des groupes de semences à des fins commerciales. Le procédé consiste à ajouter les cellules cryoconservées à un milieu situé dans le puits d'inoculation du bioréacteur employé pour l'inoculation, afin de permettre aux cellules de se développer jusqu'à ce qu'elles atteignent une concentration prédéterminée dans le puits d'inoculation alors que l'état du milieu et de l'environnement est surveillé et ajusté, puis à augmenter de manière incrémentielle le volume du milieu à l'intérieur du réacteur afin de maintenir une croissance cellulaire optimale.

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