C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/861 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12N 15/64 (2006.01) C12N 15/90 (2006.01) A61K 39/00 (2006.01)
Patent
CA 2442144
A helper dependent adenoviral vector system is provided. The subject helper dependent adenoviral vector system is made up of: (1) a "gutless" adenoviral vector that includes cis-acting human stuffer DNA that provides for in vivo long term, high level expression of a coding sequence present on the vector; (2) an adenoviral helper vector that is characterized by having an adenoviral genome region flanked by recombinase recognition sites, where the helper vectors further include a non-mammalian endonuclease recognition site positioned outside of the adenoviral genome region; and (3) a mammalian cell that expresses the corresponding recombinase and endonuclease, as well as the adenoviral preterminal and polymerase proteins (See Figure 3). Also provided are methods of using the subject systems to produce virions having the subject helper dependent adenoviral vectors encapsulated in an adenoviral capsid. In addition, kits for use in practicing the subject methods are provided.
L'invention concerne un système de vecteurs adénoviraux dépendants d'un auxiliaire, constitué: 1) d'un vecteur adénoviral n'exprimant plus de gènes viraux qui comprend un ADN de charge humain agissant en cis pour assurer un niveau d'expression in vivo élevé à long terme d'une séquence de codage présente dans le vecteur; 2) d'un vecteur adénoviral auxiliaire qui se caractérise en ce qu'il présente une région de génome adénoviral flanquée par des sites de reconnaissance de la recombinase, les vecteurs auxiliaires comprenant en outre un site de reconnaissance de l'endonucléase mammalien situé hors de la région de génome adénoviral; et 3) d'une cellule mammalienne qui exprime la recombinase et l'endonucléase correspondantes, ainsi que les protéines préterminales et polymérases. L'invention concerne également des méthodes d'utilisation des systèmes de l'invention pour produire de virions dont les vecteurs adénoviraux dépendants d'un auxiliaire sont encapsulés dans un capside adénoviral. Elle concerne en outre des trousses destinées à mettre en oeuvre les méthodes de l'invention.
Ehrhardt Anja
Kay Mark
Fetherstonhaugh & Co.
The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1399375