A method and a kit for determination of a microbial count

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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Details

C12Q 1/06 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) G01N 33/02 (2006.01) G01N 33/18 (2006.01) G01N 33/569 (2006.01)

Patent

CA 2470774

The invention relates to the field of estimating a microbial count in a sample using molecular techniques. The invention furthermore relates to a kit for performing such estimation and use of the estimation method for providing bacterial cell counts in milk and for diagnosing infectious conditions in animals and human beings. Furthermore, the invention relates to a method for quality control of food (especially milk and dairy products), feed and water samples using molecular techniques. Reproducible and reliable estimates of a microbial count can be obtained using a molecular hybridisation assay between a target nucleic acid sequence and a labelled probe. Proper calibration and quantitative recording of the signal produced by the label can estimate a microbial count. One important feature of the invention is the use of locked nucleic acid (LNA) monomers in the probes.

L'invention porte sur l'estimation à l'aide de techniques moléculaires d'une numération microbienne dans un échantillon. L'invention porte également sur un kit permettant d'effectuer cette estimation et d'utiliser le procédé d'estimation pour réaliser la numération des cellules bactériennes dans le lait et pour diagnostiquer des états infectieux chez les animaux et les êtres humains. L'invention porte en outre sur un procédé de contrôle de la qualité des aliments (notamment le lait et les produits laitiers), des aliments pour animaux et des échantillons d'eau à l'aide de techniques moléculaires. Il est possible d'obtenir des estimations reproductibles et fiables d'une numération microbienne au moyen d'une technique d'hybridation moléculaire entre une séquence d'acide nucléique cible et une sonde marquée. Un étalonnage correct et un enregistrement quantitatif du signal produit par l'étiquette permettent d'estimer une numération microbienne. Cette invention se caractérise notamment par l'utilisation dans les sondes de monomères d'acide nucléique bloqués.

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