C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01) G01N 15/10 (2006.01) G01N 21/64 (2006.01) G02B 21/00 (2006.01) G01J 3/42 (2006.01) G01N 15/14 (2006.01)
Patent
CA 2173156
A method for observation and determination of the size of individual molecules and determination of the weight distribution of a poly disperse sample comprising: placing a molecule in a medium; subjecting the molecule to an external force, causing conformational/positional changes; and measuring these changes. Preferred ways to measure conformational/positional changes include: (1) determining the rate of relaxation of a deformable molecule after termination of the external force, (2) determining the reorientation rate of a molecule when the direction of the external force is changed, (3) determining the rotation rate of a molecule, (4) measuring the length of a molecule, particularly when it is partially stretched, or (5) measuring the diameter of the molecule. Measurements involve the use of a light microscope connected to an image processor or a microscope combined with a spectroscopic device.
Procédé permettant d'observer et de déterminer la taille de molécules individuelles et de déterminer la répartition pondérale d'un échantillon contenant des molécules de tailles diverses, qui consiste à placer une molécule déformable ou non déformable dans un milieu, à soumettre ladite molécule à une force extérieure, ce qui entraîne des modifications de conformation et/ou de position et ensuite à mesurer ces modifications. Des méthodes préférées de mesure des modifications de conformation et de position consistent (1) à déterminer la vitesse à laquelle une molécule déformable revient à un état de relâchement lorsqu'elle cesse de subir la force extérieure, (2) à déterminer la vitesse à laquelle une molécule s'oriente dans une nouvelle direction lorsque la direction de la force de perturbation est modifiée, (3) à déterminer la vitesse à laquelle une molécule effectue un mouvement de rotation, (4) à mesurer la longueur d'une molécule, en particulier lorsqu'elle est au moins partiellement étirée ou (5) à mesurer au moins un diamètre d'une molécule sphérique ou ellipsoïdale. Les mesures des vitesses de relâchement, de réorientation et de rotation, ainsi que de longueur et de diamètre peuvent être effectuées à l'aide d'un microscope optique connecté à un processeur d'images. Le relâchement, la réorientation et la rotation des molécules peuvent également être déterminés à l'aide d'un microscope combiné à un dispositif spectroscopique. La présente invention est particulièrement utile pour mesurer des molécules polymères, telles que des acides nucléiques, et peut être utilisée pour déterminer la taille et l'emplacement cartographique d'enzymes de restriction. On empêche la cassure de grandes molécules polymères déposées sur une lame de microscope en condensant lesdites molécules avant de les déposer et en les dépliant après qu'elles ont été placées dans une matrice.
Gowling Lafleur Henderson Llp
New York University
Wisconsin Alumni Research Foundation
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1403997