C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/13 (2006.01) C07K 16/00 (2006.01) C07K 16/46 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12P 19/34 (2006.01) C40B 50/06 (2006.01)
Patent
CA 2402240
The present invention provides a method for producing a polynucleotide sequence encoding an antibody variable domain, the variable domain comprising complementarity-determining regions (CDRs) located within a selected framework (the 'master framework'), the method comprising the steps of (a) providing at least one nucleic acid molecule encoding one or more CDRs and associated framework regions (the 'original framework'), (b) amplifying at least one CDR- encoding portion of the nucleic acid molecule(s) of step (a) using one or more pairs of oligonucleotides as amplification primers and (c) assembling a polynucleotide sequence encoding an antibody variable domain by combining the amplified CDR-encoding nucleotide sequences produced in step (b) with nucleotide sequences encoding said master framework, wherein the oligonucleotide primers of step (b) comprise nucleotide sequences which differ from the corresponding nucleotide sequences encoding said master framework. The invention further provides an antibody library, such as a phage display library, and methods of making the same.
La présente invention concerne un procédé pour produire séquence polynucléotidique codant pour un domaine variable d'anticorps, le domaine variable comprenant des régions hypervariables (des CDR) localisées à l'intérieur d'un réseau sélectionné ("réseau maître"), le procédé comprenant les stades qui consistent en ce qui suit: (a) obtenir au moins une molécule d'acide nucléique codant une ou plusieurs CDR et les régions de réseau associées ("réseau original"), (b) amplifier au moins une partie de la (ou des) molécule(s) d'acide nucléique codant pour CDR du stade (a) en utilisant une ou plusieurs paires d'oligonucléotides comme amorces d'amplification et (c) assembler une séquence polynucléotidique codant pour un domaine variable d'anticorps par la combinaison des séquences nucléotidiques amplifiées codant pour les CDR produites au stade (b), les séquences nucléotidiques codant ledit réseau maître et les amorces nucléotidiques du stade (b) comprenant des séquences nucléotidiques qui diffèrent des séquences nucléotidiques correspondantes codant pour ce réseau maître. L'invention concerne en outre une bibliothèque d'anticorps telle qu'une bibliothèque d'expression à la surface des phages ainsi que des procédés correspondants.
Carlsson Roland
Ohlin Mats
Soderlind Eskil
Bioinvent International Ab
Borden Ladner Gervais Llp
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1541837