C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 5/0735 (2010.01) A61K 35/12 (2006.01) A61K 35/48 (2006.01) C12Q 1/02 (2006.01)
Patent
CA 2624728
A method for obtaining a stable xeno-free hBS cell line, xeno-free hBS cell lines obtained according to said method and use thereof. The method comprises the steps of: i) removing the zona pellucida from a blastocyst to obtain trophectodermenclosed inner cell mass by a xeno-free procedure, ii) at least partly removing the trophectoderm to obtain isolated inner cell mass cells by a xeno-free procedure, iii) placing the inner cell mass cells on a layer of human feeder cells in a xeno-free medium, iv) co-culturing of the inner cell mass cells with human feeder cells for a time period of from about 5 days to about 50 days in a xeno-free medium, v) releasing the inner cell mass cells or cells derived thereof from trophectoderm overgrowth, if any, by a xeno-free procedure, vi) selectively, transferring the inner cell mass cells or cells derived thereof to a fresh layer of human feeder cells in a xeno-free medium to obtain xeno-free hBS cells, vii) propagating the xeno-free hBS cells by co- culturing with human feeder cells in a xeno-free medium to obtain a xeno-free hBS cell line. The xeno-free hBS cell line is suitable for use in medicine and in in vitro testing.
La présente invention a trait à un procédé pour l'obtention d'une lignée cellulaire hBS exempte de xéno-contaminants, des lignées cellulaires hBS exemptes de xéno-contaminants obtenues selon ledit procédé et leurs utilisation. Le procédé comprend les étapes suivantes: i) l'élimination de la zone pellucide à partir d'un blastocyste pour obtenir une masse cellulaire interne enfermée dans un trophectoderme par une procédure exempte de xéno-contaminants; ii) l'élimination au moins partielle du trophoctoderme pour obtenir des cellules de masse cellulaire interne isolées par une procédure exempte de xéno-contaminants; iii) le placement des cellules de masse cellulaire interne sur une couche de cellules nourricières humaines dans un milieu exempt de xéno-contaminants; iv) la co-culture des cellules de masse cellulaire interne avec des cellules nourricières humaines pour une période de temps d'environ 5 jours à environ 50 jours dans un milieu exempt de xéno-contaminants; v) la libération des cellules de masse cellulaire interne ou des cellules dérivées de celles-ci de toute croissance excessive de trophectoderme, le cas échéant, par une procédure exempte de xéno-contaminants; vi) le transfert sélectif des cellules de masse cellulaire interne ou des cellules dérivées de celles-ci vers une couche fraîche de cellules nourricières humaines dans un milieu exempt de xéno-contaminants pour obtenir des cellules hBS exemptes de xéno-contaminants; vii) la propagation des cellules hBS exemptes de xéno-contaminants par une co-culture avec des cellules nourricières humaines dans un milieu exempt de xéno-contaminants pour obtenir une lignée cellulaire hBS exempte de xéno-contaminants. La lignée cellulaire hBS exempte de xéno-contaminants est apte à être utilisée en médecine et dans l'essai in vitro.
Ellerstrom Catharina
Frej Katarina
Hyllner Sven Johan
Kilmare Eva Karin
Moya Karina
Cellartis Ab
Fetherstonhaugh & Co.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1382149