C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/877 (2010.01) C12N 5/073 (2010.01) C12N 15/87 (2006.01)
Patent
CA 2334954
The present invention provides a method for producing cloned tigers by employing inter-species nuclear transplantation technique. The method for producing cloned tigers of the invention comprises the steps of: preparing donor somatic cell lines collected from tiger; maturing oocytes collected from ovary of cow or cat in vitro; removing the cumulus cells surrounding the oocytes; cutting a portion of zona pellucida of the matured oocytes to make a slit, and squeezing out a portion of cytoplasm including the first polar body through the slit to give enucleated recipient oocytes; transferring a nucleus to the recipient oocyte by injection of the donor cells to the enucleated recipient oocytes, followed by the subsequent electrofusion and activation of the electrofused cells to give embryos; postactivating and culturing the embryos in vitro; and, transferring the cultured embryos into surrogate mothers to produce cloned tigers. The present invention can be widely applied in preservation of genetic characters of rare or endangered species permanently in the form of nuclear transferred embryos.
Cette invention se rapporte à un procédé permettant de produire des tigres clonés en utilisant une technique de transplantation de noyau inter-espèces. Ce procédé de production de tigres clonés consiste: à préparer des lignées de cellules somatiques donneuses, prélevées sur un tigre; à faire mûrir des ovocytes prélevés de l'ovaire d'une vache ou d'un chat in vitro; à retirer les cellules cumuliques entourant les ovocytes, à découper une partie de la membrane pellucide des ovocytes mûris, pour pratiquer une fente, et à faire sortir par pression une partie du cytoplasme contenant le premier corps polaire par ladite fente, pour donner des ovocytes receveurs énucléés; à transférer le noyau dans l'ovocyte receveur par injection des cellules donneuses dans les ovocytes receveurs énucléés, puis à pratiquer une électrofusion ultérieure et une activation des cellules ainsi électrofusionnées, pour produire des embryons; à post-activer et cultiver les embryons in vitro; et à transférer des embryons ainsi cultivés dans des mères porteuses, en vue de produire des tigres clonés. Cette invention peut être largement appliquée à la conservation des caractères génétiques d'espèces rares ou en danger de façon permanente sous la forme d'embryons de transfert de noyau.
Ahn Gook-Jun
Cho Jong-Ki
Hwang Woo-Suk
Hyun Sang-Hwan
Kim Ki-Yon
Cassan Maclean
Hwang Woo-Suk
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1359126