C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 5/00 (2006.01) C12N 5/077 (2010.01) C12Q 1/04 (2006.01) C12N 5/06 (2006.01)
Patent
CA 2640644
An object of the invention is to develop a method for purifying a cardiac myocyte to a high degree and at a high yield from a cell mixture containing the cardiac myocyte derived from a fetus and a stem cell using various characteristics which were not assumed to be used for the purpose of cardiac myocyte purification in the past or various characteristics which were newly found without undergoing genetic modification and adding a special protein or a biologically active substance. The inventors of the invention found that a cardiac myocyte can be efficiently selected and purified to a high degree by culturing a cardiac myocyte derived from an embryonic stem cell in a culture medium in a low serum condition, a low sugar condition, a low nutrient condition, a low calcium condition, a slightly acidic pH condition, a condition where lactic acid is added, a condition where aspartic acid/glutamic acid are added and/or a condition where pyruvic acid is added. Further, they found that the method found by using an embryonic stem cell can be applied to the selection/purification of a cardiac myocyte derived from a fetus and the selection/purification of a cardiac myocyte derived from an adult stem cell.
L'invention a pour objet de développer un procédé permettant de purifier des myocytes cardiaques à un degré élevé et avec un rendement élevé à partir d'un mélange de cellules contenant des myocytes cardiaques d'origine foeale et des cellules souches en utilisant diverses caractéristiques qu'on ne pensait pas pouvoir utiliser dans le passé dans le but de purifier des myocytes cardiaques, ou diverses caractéristiques nouvellement découvertes, sans subir de modification génétique ni ajouter une protéine spéciale ou une substance biologiquement active. Les inventeurs de l'invention ont découvert que les myocytes cardiaques peuvent être efficacement sélectionnés et purifiés à un degré élevé en cultivant des myocytes cardiaques provenant de cellules souches embryonnaires dans un milieu de culture en conditions de faible concentration en sérum, de faible concentration en sucre, de faible concentration en nutriments, de faible concentration en calcium, de pH légèrement acide, dans une condition dans laquelle de l'acide lactique est ajouté, dans une condition dans laquelle de l'acide aspartique/acide glutamique sont ajoutés et/ou dans une condition dans laquelle de l'acide pyruvique est ajouté. En outre, ils ont découvert que le procédé trouvé en utilisant des cellules souches embryonnaires peut être appliqué à la sélection/purification de myocytes cardiaques d'origine foeale et à la sélection/purification de myocytes cardiaques dérivés de cellules souches adultes.
Fukuda Keiichi
Hattori Fumiyuki
Asubio Pharma Co. Ltd.
Daiichi Sankyo Company Limited
Keio University
Norton Rose Canada S.e.n.c.r.l.,s.r.l./llp
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1606313