C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/18 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01)
Patent
CA 2500757
A method for screening a polynucleotide encoding an antimicrobial peptide (AMP) for its antimicrobial activity. The polynucleotide is introduced in a host cell under the control of an inducible promoter. By allowing the host cells, which are sensitive to the AMP, to grow in the absence of AMP before inducer is added, enough host cells will be present to produce enough AMP, instead of the killing or early inhibition of host cells by growing them from the start in the presence of AMP. After the inducer has been added and AMP is expressed in the host cell, the host cell is grown in the presence of indicator cells. Host cells capable of reducing the proliferation of indicator cells are selected. The polynucleotide encoding an AMP is only introduced into a single type of host cells but the AMP activity towards several different indicator cells can be tested without having to introduce the polynucleotide into more than one host cell.
L'invention concerne une méthode de criblage d'un polynucléotide codant un peptide antimicrobien (AMP) pour son activité antimicrobienne. Le polynucléotique est introduit dans une cellule hôte sous la commande d'un promoteur inductible. Le fait de permettre à des cellules hôtes, sensibles à l'AMP, de croître en l'absence d'AMP avant l'ajout de l'inducteur fait que suffisamment de cellules hôtes sont présentes pour produire suffisamment d'AMP, au lieu d'éliminer ou d'inhiber précocement des cellules hôtes en les cultivant dès le départ en présence d'AMP. Après l'ajout de l'inducteur et l'expression de l'AMP dans la cellule hôte, la cellule hôte est cultivée en présence de cellules indicatrices. Les cellules hôtes pouvant réduire la prolifération de cellules indicatrices sont sélectionnées. Le polynucléotide codant un AMP est introduit seulement dans un seul type de cellules hôte, mais l'activité de l'AMP vers différentes cellules indicatrices peut être testée sans qu'il soit nécessaire d'avoir recours à l'introduction du polynucléotide dans plusieurs cellules hôtes.
Ellingsgaard Ida
Hansen Anja Lykke
Hogenhaug Hans-Henrik Kristensen
Mygind Per Holse
Segura Dorotea Raventos
Novozymes A/s
Ogilvy Renault Llp/s.e.n.c.r.l.,s.r.l.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1991853