A method for the preparation of recombinant human thrombin...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

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C12N 15/57 (2006.01) C07K 14/75 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 9/74 (2006.01) C12N 15/12 (2006.01) C12N 15/85 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)

Patent

CA 2644926

The present invention discloses a novel method for the preparation of recombinant human proteins Specifically the invention relates to novel methods for the preparation of human recombinant thrombin

La présente invention concerne un nouveau procédé de préparation des protéines humaine recombinante exprimées dans des cellules humaines. Notamment, la présente invention concerne de nouveaux procédés de préparation de la thrombine humaine recombinante et du fibrinogène humain recombinant. De plus, le procédé emploie des conditions de culture exemptes de sérum et par conséquent délivre au patient des protéines humaines recombinantes exprimées dans des cellules humaines avec une innocuité croissante quand elle est utilisée dans des traitements médicamenteux humains. De plus, la réponse immunogène aux protéines recombinantes humaines exprimées dans des cellules humaines peut être inférieure. Une thrombine humaine recombinante est exprimée dans la lignée cellulaire 293 du rein embryonnaire humain et la protéine peut être préparée en utilisant deux voies différentes, l'une partant de la prothrombine à mutation ponctuelle avec des domaines 1 et 2 gla et Kringle, et en conservant ces domaines durant le procédé; l'autre partant de la prothrombine (non-mutée), via une préthrombine présentant un domaine HPC4-Kringle 2 et en soumettant cette préthrombine à une mutation ponctuelle. Le fibrinogène humain recombinant est exprimé dans la lignée cellulaire 293 du rein embryonnaire humain.

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