A method of affinity separation and ligands for use therein

Details A method of affinity separation and ligands for use therein A method of affinity separation and ligands for use therein

C - Chemistry, Metallurgy

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N

C12N 15/31 (2006.01) C07K 1/22 (2006.01) C07K 14/31 (2006.01) C07K 14/315 (2006.01) C07K 14/76 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12N 15/11 (2006.01) C12N 15/62 (2006.01)

Patent

CA 2347960

The present invention relates to methods of affinity separation wherein the affinity ligand is an immobilised proteinaceous ligand wherein one or more of its asparagine (Asn) residues has been modified. Methods of mak-ing a stabilised combinatorial protein comprising the steps of: a) modifica-tion of Asn residues within a protein molecule to increase stability of the protein in alkaline conditions; and b) randomisation of the protein molecule to modify its binding characteristics and combinatorial proteins wherein in a step separate from the randomisation step, the stability of the protein in al-kaline conditions has been increased by modifying one or more of its Asn residues are also described.

Cette invention se rapporte à des procédés de séparation par affinité, dans lesquels le ligand d'affinité est constitué par un ligand protéiné immobilisé, dont un ou plusieurs de ses restes'asparagine (Asn) ont été modifiés. Les procédés de formation d'une protéine combinatoire stabilisée consistent: (a) à modifier des résidus Asn à l'intérieur d'une molécule de protéine pour accroître la stabilité de la protéine dans des conditions alcalines; (b) et à randomiser la molécule de cette protéine pour modifier ses caractéristiques de liaison. Cette invention présente également des protéines combinatoires pour lesquelles, dans une étape séparée de l'étape de randomisation, la stabilité de la protéine dans des conditions alcalines a été augmentée par modification d'un ou de plusieurs de ses résidus Asn.

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