C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01) C12P 19/34 (2006.01)
Patent
CA 2661344
A method allowing simultaneous amplification of multiple low-abundance targets in environmental samples. This is a two-step process that includes a combined reverse transcription and pre-amplification step, which utilizes a mix of gene-specific primer sets, followed by a second amplification step performed on the previously generated "RT- amplification" product. Initial amplification of each target is performed prior to the splitting of the sample for individual amplification and identification. The method combines the process of reverse transcription and amplification within a single processing apparatus. The method also enables gene-specific reverse transcription using gene-specific primers, thereby reducing if not eliminating non-specific product in this reverse transcription step of the process.
L'invention concerne un procédé permettant l'amplification simultanée de cibles multiples de faible abondance dans des échantillons environnementaux. Ceci est un processus à deux étapes qui comprend une étape de préamplification et de transcription inverse combinées, qui utilise un mélange d'ensembles d'amorces spécifiques à un gène, suivie par une seconde étape d'amplification réalisée sur le produit à 'amplification-RT' généré précédemment. Une amplification initiale de chaque cible est réalisée avant la séparation de l'échantillon pour une amplification et une identification individuelles. Le procédé combine le processus de transcription inverse et d'amplification dans un appareil de traitement unique. Le procédé active également une transcription inverse spécifique à un gène à l'aide d'amorces spécifiques à un gène, réduisant de ce fait (voire éliminant) un produit non spécifique dans cette étape de transcription inverse du processus.
Cameron Ip
Microfluidic Systems Inc.
LandOfFree
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