C - Chemistry – Metallurgy – 07 – K
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
07
K
C07K 14/705 (2006.01) C07K 14/74 (2006.01) C12P 21/02 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01)
Patent
CA 2343313
The present invention relates to a process of producing a functional immunoglobulin superfamily protein, which has at least one disulphide bond when functional, the process comprising the steps of providing a bacterial cell, where the gene is expressible, isolating the protein from the cell without reducing it and subjecting the isolated protein to a folding treatment. Preferably, the immunoglobulin superfamily protein is selected from the group consisting of Class I and Class II histocompatibility molecules and beta 2 microglobulin (beta2m). Other embodiments of the invention is a stable peptide free MHC protein obtainable by a process of the invention and a kit comprising a MHC class I heavy chain and a abeta2m allowing the recipient to produce and measure or detect a functional MHC class I protein to which a peptide, which is capabe of binding to said MHC class I protein, can be added leading to the generation of a functional MHC class I protein.
La présente invention porte sur un procédé de production d'une protéine fonctionnelle de la superfamille des immunoglobulines, cette protéine ayant au moins une liaison disulfure lorsqu'elle est fonctionnelle. Le procédé consiste à produire une cellule bactérienne comprenant un gène codant pour la protéine, le gène pouvant être exprimée dans la cellule, cultiver la cellule dans des conditions où le gène est exprimé, isoler la protéine de la cellule sans la réduire, et soumettre la protéine isolée à un traitement de repliement. De préférence, la protéine de la superfamille des immunoglobulines est sélectionnée dans le groupe comprenant des anticorps, des régions variables (V) d'immunoglobulines, des régions constantes (C) d'immunoglobulines, des chaînes légères d'immunoglobulines, des chaînes lourdes d'immunoglobulines, des molécules du complexe majeur d'histocompatibilité des classes I et II, CD1, CD2, CD3, la microglobuline .beta.¿2? (.beta.¿2?m), l'antigène 3 associé à la fonction lymphocytaire (LFA-3) et Fc.gamma.RIII, CD7, CD8, Thy-1 -t Tp44 (CD28), le récepteur des lymphocytes T, CD4, le récepteur de la polyimmunoglobuline, la molécule d'adhésion des cellules neuronales (NCAM), la glycoprotéine associée à la myéline (MAG), la protéine de la myéline P, l'antigène carcino-embryonnaire (CEA), le récepteur du facteur de croissance d'origine plaquettaire (PDGFR), le récepteur du facteur 1 de croissance des globules blancs, la glycoprotéine .alpha..beta., ICAM (la molécule d'adhésion intracellulaire), les plaquettes et les interleukines. Cette invention porte de préférence sur une protéine stable du complexe majeur d'histocompatibilité exempte de peptides et pouvant être obtenue par un procédé de l'invention, et sur un kit comprenant une chaîne lourde de la classe I du complexe majeur d'histocompatibilité et une .beta.¿2?m permettant au récepteur de produire et mesurer ou détecter une protéine de la classe I du complxe majeur d'histocompatibilité à laquelle peut être ajouté un peptide, capable de se lier à cette protéine et de générer une protéine fonctionnelle de la classe I du complexe majeur d'histocompatibilité.
Buus Soren
Pedersen Lars Ostergaard
Buus Soren
Pedersen Lars Ostergaard
Sim & Mcburney
LandOfFree
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