C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01) G01N 21/00 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01) G01N 33/542 (2006.01) G01N 33/58 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01)
Patent
CA 2454368
Methods to determine the activity of any and all DNA binding factors, proteins or fragments thereof based upon the detection of a change in a luminescence or fluorescence signal are provided. Preferably, a fluorescence donor is attached to a nucleic acid comprising one portion of a DNA binding element and a fluorescence acceptor is attached to a nucleic acid comprising the other portion of the same binding element. Alternatively, a microsphere bead is attached to a nucleic acid comprising one portion of a binding element and a luminescent moiety or fluorochrome is attached to a nucleic acid comprising the other portion of the same binding element. Binding of a DNA binding factor to the nucleic acid components affects a change in luminescence. These methods may also be used to detect mediating analytes, to diagnose diseases and/or screen for drugs that mediate the activity of DNA binding factors.
L'invention concerne des méthodes permettant de déterminer l'activité de l'un quelconque et de tous les facteurs, protéines de liaison ou fragments de celles-ci fondées sur la détection d'un changement dans un signal de luminescence ou de fluorescence. Un donneur de fluorescence est, de préférence, fixé à un acide nucléique comprenant une partie d'un élément de liaison d'ADN et un accepteur de fluorescence est fixé à un acide nucléique comprenant l'autre partie du même élément de liaison. Dans un autre mode de réalisation, une bille microsphérique est fixée à un acide nucléique comprenant au moins une partie d'un élément de liaison et une fraction luminescente ou un fluorochrome est fixé à un acide nucléique comprenant l'autre partie du même élément de liaison. La liaison d'un facteur de liaison d'ADN avec des composants d'acide nucléique affecte un changement de luminescence. On peut également utiliser ces méthodes pour détecter des analytes de médiation, diagnostiquer des maladies et/ou analyser des médicaments qui ont un effet médiateur sur l'activité des facteurs de liaison d'ADN.
Mcfadden Fincham
Saint Louis University
LandOfFree
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