A repressor-mediated regulation system for control of gene...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

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C12N 15/82 (2006.01) A01H 1/00 (2006.01) A01H 4/00 (2006.01) A01H 5/00 (2006.01) A01H 5/10 (2006.01) C07K 14/195 (2006.01) C12N 15/31 (2006.01) C12N 15/52 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01)

Patent

CA 2447933

The invention provides a method for selectively controlling the transcription of a gene of interest, comprising producing one or more plants that express either a first, a second, or both the first and second genetic constructs. The first genetic construct, comprises a first regulator region operatively linked to a gene of interest and at leat one repressor sequence capable of controlling the activity of the first regulatory region. The second genetic construct comprises a second regulator region in operative association with a nucleic acid molecule, or a derivative thereof, encoding a repressor protein, the repressor protein exhibiting both repressor operator sequence binding activity and repressor activity. The first and second genetic constructs may reside on separate vectors, or the vector may comprise both the first and second genetic constructs comprised as just defined. If the first and second constructs reside within separate plants, then the fisrt plant and the second plant are crossed to obtain progeny, so that the progeny comprise both the first genetic construct and the second, genetic construct. The progeny of this cross are characterized in that the expression of the second genetic construct represses expression of the gene of interest. The first and second regulatory regions may be either the same or different and may be selected from the group consisting of a constitutive promoter, an inducible promoter, a tissue specific promoter, and a developmental promoter. If the plant comprises the vector that comprises both the first and second genetic construct, or of a plant has been co-transformed with the first and second genetic construct so that both the first and second genetic constructs may be expressed in the same plant, then it is preferred thet the first and second regulatory regions are different. The first regulatory region may comprise a constitutive promoter, an inducible promoter, a tissue specific promoter, or a developmental promoter. The second regulatory region may comprise an inducible promoter, a tissue specific promoter, or a developmental promoter.

Cette invention se rapporte à un procédé servant à commander sélectivement la transcription d'un gène d'intérêt et consistant à cet effet à produire une ou plusieurs plantes qui expriment un premier et/ou un second produit de synthèse génétique. Le premier produit de synthèse génétique comprend une première zone régulatrice liée fonctionnellement à un gène d'intérêt et au moins une séquence opératrice de répresseur capable de commander l'activité de la première zone régulatrice. Le second produit de synthèse génétique comprend une seconde zone régulatrice associée fonctionnellement à une molécule d'acide nucléique, ou un dérivé de celle-ci, codant une protéine répresseur, laquelle possède à la fois une activité de fixation de la séquence opératrice de répresseur et une activité de répresseur. Le premier et le second produit de synthèse génétique peuvent résider sur des vecteurs séparés, ou alors le même vecteur peut comporter à la fois le premier et le second produit de synthèse génétique constitués comme défini ci-dessus. Si le premier et le second produit de synthèse résident dans des plantes séparées, alors la première plante et la seconde plante sont croisées pour produire une descendance, de telle sorte que cette descendance contient à la fois le premier produit de synthèse génétique et le second produit de synthèse génétique. La descendance résultant de ce croisement se caractérise en ce que l'expression du second produit de synthèse génétique réprime l'expression du gène d'intérêt. La première et la seconde zone régulatrice peuvent être soit identiques soit différentes et elles peuvent être choisies dans le groupe composé par un promoteur constitutif, un promoteur induisible, un promoteur à spécificité tissulaire et un promoteur de développement. Si la plante comprend le vecteur qui contient à la fois le premier et le second produit de synthèse génétique ou si une plante a été transformée conjointement par le premier et le second produit de synthèse génétique, pour que les deux produits de synthèse génétique puissent être exprimés dans la même plante, alors il est préférable que la première et la seconde zone régulatrice soient différentes. La première zone régulatrice peut comporter un promoteur constitutif, un promoteur induisible, un promoteur à spécificité tissulaire ou un promoteur de développement. La seconde zone régulatrice peut comporter un promoteur induisible, un promoteur à spécificité tissulaire ou un promoteur de développement.

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