C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/864 (2006.01) C07K 14/015 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01)
Patent
CA 2655957
The present invention relates nucleic acid constructs for the production of recombinant parvoviral (e.g. adeno-associated viral) vectors in insect cells, to insect cells comprising such constructs and to methods wherein the cells are used to produce recombinant parvoviral virions. The insect cells preferably comprise a first nucleotide sequence encoding the parvoviral rep proteins whereby the initiation codon for translation of the parvoviral Rep78 protein is a suboptimal initiation codon that effects partial exon skipping upon expression in insect cells. The insect cell further comprises a second nucleotide sequence comprising at least one parvoviral (AAV) inverted terminal repeat (ITR) nucleotide sequence and a third nucleotide sequence comprising a sequences coding for the parvoviral capsid proteins.
La présente invention concerne des produits de construction d'acide nucléique pour la production de vecteurs parvoviraux recombinants (par exemple, virus associé à l'adénovirus) dans des cellules d'insecte, les cellules d'insecte comprenant de tels produits de construction et les procédés dans lesquels les cellules sont utilisées pour produire des virions parvoviraux recombinants. Les cellules d'insecte comprennent de préférence une première séquence nucléotidique codant pour les protéines rep parvovirales, ce par quoi le codon d'initiation pour la traduction de la protéine Rep78 parvovirale est un codon d'initiation sous optimal qui effectue un saut d'exon partiel lors de l'expression dans des cellules d'insecte. La cellule d'insecte comprend en outre une seconde séquence nucléotidique comprenant au moins une séquence de 10 nucléotides (ITR) de répétition terminale inversée (AAV) parvovirale et une troisième séquence nucléotidique comprenant des séquences codant pour les protéines de capside parvovirales.
Bakker Andrew Christian
Biesmans Dennis Johan
Haast Saskia Jacoba Petronella
Hermens Wilhelmus Theodorus Johannes Maria Christiaan
Amsterdam Molecular Therapeutics B.v.
Gowling Lafleur Henderson Llp
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1959542