Allele-specific rna interference

C - Chemistry – Metallurgy – 07 – H

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C07H 21/04 (2006.01)

Patent

CA 2624673

Human diseases caused by dominant, gain-of-function mutations develop in heterozygotes bearing one mutant and one wild-type copy of a gene. Because the wild- type gene often performs important functions, whereas the mutant gene is toxic, any therapeutic strategy must selectively inhibit the mutant while retaining wild-type gene expression. The present invention includes methods of specifically inhibiting the expression of a mutant allele, while preserving the expression of a co-expressed wild-type allele using RNAi, a therapeutic strategy for treating genetic disorders associated with dominant, gain-of- function gene mutations. The invention also includes small interfering RNAs (siRNAs) and small hairpin RNAs (shRNAs) that selectively suppress mutant, but not wild-type, expression of copper zinc superoxide dismutase (SODl), which causes inherited amyotrophic lateral sclerosis (ALS). The present invention further provides asysmmetric siRNAs and shRNAs with enhanced efficacy and specificity and mediating RNAi.

Des maladies humaines provoquées par des mutations de gain de fonction dominantes se développent dans des hétérozygotes portant un mutant et une copie de gène de type sauvage. Etant donné que le gène de type sauvage remplit souvent des fonctions importantes alors que le gène mutant est toxique, une stratégie thérapeutique quelconque doit sélectivement inhiber le mutant tout en conservant l'expression du gène de type sauvage. L'invention concerne des méthodes permettant d'inhiber sélectivement l'expression d'un allèle mutant tout en préservant l'expression d'un allèle de type sauvage co-exprimé à l'aide d'un ARNi, et une stratégie thérapeutique permettant de traiter des troubles génétiques associés à des mutations de gain de fonction dominantes. L'invention concerne également de petits ARN interférants (ARNsi) et de petits ARN en épingle à cheveux (ARNs) qui permettent de supprimer sélectivement une expression mutante, mais pas provoque la sclérose latérale amyotrophique héréditaire (ALS). L'invention concerne enfin des ARNsi et des ARNsh asymétriques à efficacité et spécificité améliorées et à médiation d'ARNi.

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