Allergen detection method using immunochromatography

G - Physics – 01 – N

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G01N 33/53 (2006.01) G01N 33/543 (2006.01)

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CA 2752126

A method is disclosed which rapidly detect allergens with good accuracy by efficiently extracting the allergens from a test sample such as food containing various allergens and eliminating non-specific reactions accompanying the disintegration of colloidal gold conjugated to antibodies by not using a reducing agent. The method uses a developing solution containing at least 10% by weight of FBS in an immunochromatography method which comprises using a colloidal gold-labeled antibody in which a colloidal gold is bound to a monoclonal antibody against denatured and native allergen, a development support wherein a monoclonal antibody against denatured and native allergen recognizing an epitope different from that recognized by the colloidal gold-labeled antibody is fixed, measurement samples of the allergens extracted from the test sample with an anionic surfactant such as SDS and a thiosulfate or an anionic surfactant such as SDS and a non-ionic surfactant such as Tween 20, and the developing solution; developing the developing solution on the development support; and then detecting the allergens based on the presence of the deposition of the colloidal gold.

La méthode de détection des allergènes selon la présente invention permet d'extraire efficacement les allergènes d'un échantillon de matière, comme un produit alimentaire contenant les allergènes, et de détecter rapidement et précisément les allergènes grâce à l'élimination des réactions non spécifiques accompagnant la désintégration de l'or colloïdal lié à un anticorps sans l'utilisation d'un agent réducteur. Une solution de développement contenant au moins 10 % de FBS est utilisée avec une méthode immunochromatographique qui utilise des anticorps marqués avec de l'or colloïdal, l'or colloïdal étant lié à des anticorps monoclonaux dirigés contre les allergènes dénaturés et natifs, une base de développement sur laquelle sont fixés des anticorps monoclonaux reconnaissant des épitopes différents de ceux reconnus par les anticorps marqués avec de l'or colloïdal, un échantillon de dosage d'allergène extrait de l'échantillon de matière avec du SDS ou un autre tensioactif anionique et un thiosulfate, ou du SDS ou un autre tensioactif anionique et le Tween 20 ou un autre tensioactif non ionique, et une solution de développement. De plus, la méthode détecte les allergènes en fonction de la présence ou non d'une concentration d'or colloïdal après le développement de la solution de développement sur la base de développement.

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