An adenovirus helper-virus system

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 15/86 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01) C12N 15/861 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)

Patent

CA 2218610

An adenoviral helper viruses system is disclosed that is capable of expressing up to 36 kB of heterologous DNA in a replication defective adenoviral vector. The system comprises adenoviral vector constructs, one or more helper viruses and a helper cell line. The vector construct is capable of being replicated and packaged into a virion particle in the helper cell when coinfected with a helper virus that contains a defective packaging signal. In particular, the helper cell expresses DNA from one or more of the "early" codings regions of the adenovirus 5 genome (Ad5) and one or more helper viruses express DNA from one or more of the "early" coding regions and all of the later coding regions of the Ad5 genome, complementing mutations in the corresponding regions of the vector. Also disclosed are methods of transferring heterologous DNA-containing vectors into mammalian cells.

L'invention concerne un système adénovirale à virus auxiliaires capable d'exprimer jusqu'à 36 kilobase (kb) d'ADN hétérologue dans un vecteur adénovirale à réplication déficiente. Le système comprend des constructions de vecteur adénovirale, un ou plusieurs virus auxiliaires et une lignée cellulaire auxiliaire. La construction de vecteur peut faire l'objet d'une réplication et d'une encapsidation pour se transformer en virion dans la cellule auxiliaire au moment de la coinfection avec un virus auxiliaire qui contient un signal d'encapsidation déficient. En particulier, la cellule auxiliaire exprime l'ADN depuis une ou plusieurs des régions de codage "précoce" du génome d'adénovirus 5 (Ad5) et un ou plusieurs virus auxiliaires expriment l'ADN depuis ou ou plusieurs des régions de codage "précoce" et depuis l'ensemble des regions à codage ultérieur du génome Ad5, ce qui permet de compléter les mutations dans les régions correspondantes du vecteur. On décrit également des procédés pour transférer les vecteurs contenant l'ADN hétérologue dans des cellules des mammifères.

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