H - Electricity – 01 – J
Patent
H - Electricity
01
J
H01J 49/04 (2006.01)
Patent
CA 2293593
The present invention is directed to a method for the rapid testing of a plurality of compounds for non-covalent interaction with at least one target. The method includes the steps of providing a continuous flow of a mobile phase into a mass spectrometer; providing settings for the mass spectrometer for detecting at least one target in the mobile phase; sequentially injecting individual samples of a plurality of mixtures, wherein each mixture comprises the at least one target and at least one compound of interest, into the mobile phase for delivery into the mass spectrometer; and obtaining a mass spectrum that indicates for each mixture the presence or absence of a complex of a target and a compound of interest. Preferably, each sample is completely injected into the mobile phase within less than 5 minutes, and more preferably within less than 1 minute and even more preferably within less than 30 seconds. The method of the invention may be multiplexed by forming a mixture containing one target and a plurality of compounds of interest; one compound of interest and a plurality of targets of receptor proteins or receptor-ligand complexes. The plurality of mixtures are typically formed in a plurality of addressable locations, such as the wells of a multiple-well plate. Samples of the mixtures are then obtained from the addressable locations, and sequentially injected into the mobile phase for delivery to the mass spectrometer. The relative strength of the interaction between the target and the compound of interest within each complex also may be determined by dissociating at least one complex of a target and a compound of interest.
L'invention concerne un procédé qui permet de tester rapidement une pluralité de composés à la recherche d'une interaction non covalente avec au moins une cible. Le procédé comprend les étapes suivantes: on introduit un flux continu constitué d'une phase mobile dans un spectromètre de masse; on règle les paramètres dudit spectromètre de façon à détecter au moins une cible contenue dans la phase mobile; on injecte progressivement dans ladite phase mobile différents échantillons d'une pluralité de mélanges, chaque mélange comprenant au moins la cible et au moins un composé d'intérêt, de façon à les faire passer dans le spectromètre; et on obtient un spectre de masse qui indique pour chaque mélange la présence ou l'absence d'un complexe constitué de la cible et du composé d'intérêt. De préférence, on injecte la totalité de chaque échantillon dans la phase mobile en moins de 5 minutes, encore mieux en moins d'une minute et idéalement en moins de 30 secondes. On peut multiplexer le procédé de l'invention en constituant un mélange qui contient une seule cible et une pluralité de composés d'intérêt, ou bien un seul composé d'intérêt et une pluralité de cibles de protéines récepteurs ou de complexes récepteur-ligand. Typiquement, on forme la pluralité de mélanges au niveau d'une pluralité de sites adressables, tels que les puits d'une plaque multipuits. On retire les échantillons de mélanges des sites adressables, puis on les injecte progressivement dans la phase mobile de façon à les amener au spectromètre de masse. On peut également déterminer la force relative de l'interaction entre la cible et le composé d'intérêt au sein de chaque complexe en dissociant au moins un complexe constitué d'une cible et d'un composé d'intérêt.
Kyranos James N.
Li Yu-Tysr
Arqule Inc.
Smart & Biggar
LandOfFree
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