C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 7/02 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 7/01 (2006.01) C12N 15/861 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01)
Patent
CA 2353787
The present invention addresses the need to improve the yields of viral vectors when grown in cell culture systems. In particular, it has been demonstrated that for adenovirus, the use of low-medium perfusion rates in an attached cell culture system provides for improved yields. In other embodiments, the inventors have shown that there is improved Ad-p53 production with cells grown in serum-free conditions, and in particular in serum-free suspension culture. Also important to the increase of yields is the use of detergent lysis. Combination of these aspects of the invention permits purification of virus by a single chromatography step that results in purified virus of the same quality as preparations from double CsC1 banding using an ultracentrifuge.
La présente invention se rapporte à la nécessité d'améliorer des rendements en vecteurs viraux obtenus par des procédés de culture cellulaires. Il a été démontré, en particulier, que pour les adénovirus, l'utilisation de vitesses de perfusion faibles à moyennes dans un système de culture cellulaire fixe permettait d'assurer un meilleur rendement. Dans d'autres modes de réalisation, les inventeurs ont démontré une production améliorée d'Ad-p53 avec des cellules cultivées dans un milieu sans sérum, et en particulier dans une culture en suspension sans sérum. L'utilisation d'une lyse à l'aide de détergents constitué également un facteur important dans l'accroissement des rendements. Lorsque les aspects de l'invention sont combinés, les virus peuvent être purifiés en une seule étape chromatographique, ce qui permet d'obtenir des virus purifiés ayant la même qualité que des préparation effectuées à partir de double bandes de CsCl au moyen d'une ultracentrifugeuse.
Cho Toohyon
Gallagher Shawn
Thwin Capucine
Wu Zheng
Zhang Shuyuan
Crucell Holland B.v.
Goudreau Gage Dubuc
Introgen Therapeutics Inc.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1930832