Analyte detection

Details Analyte detection Analyte detection

C - Chemistry, Metallurgy

12

P

C12P 19/34 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)

Patent

CA 2495887

A method of characterizing an analyte sample is provided that includes the steps of: (a) anchoring the analyte to a nucleic acid template of known sequence; (b) conducting a DNA polymerase reaction that includes the reaction of a template, a non-hydrolyzable primer, at least one terminal phosphate- labeled nucleotide, DNA polymerase, and an enzyme having 3' 5' exonuclease activity which reaction results in the production of labeled polyphosphate; (c) permitting the labeled polyphosphate to react with a phosphatase to produce a detectable species characteristic of the sample; (d) detecting the detectable species. The method may include the step of characterizing the nucleic acid sample based on the detection. Also provided are methods of analyzing multiple analytes in a sample, and kits for characterizing analyte samples.

L'invention concerne un procédé de caractérisation d'un échantillon d'analyte qui consiste (a) à ancrer l'analyte à un modèle d'acide nucléique de séquence connue ; (b) à réaliser une réaction d'ADN polymérase qui comprend la réaction d'un modèle, d'une amorce non hydrolysable, d'au moins un nucléotide marqué sur le phosphate de terminaison, d'ADN polymérase, et d'une enzyme à activité exonucléase 3'.fwdarw.5', ladite réaction aboutissant à la production d'un polyphosphate marqué ; (c) à permettre au polyphosphate marqué de réagir avec une phosphatase afin de produire une espèce détectable caractéristique de l'échantillon ; (d) à détecter l'espèce détectable. Le procédé peut également consister à caractériser l'échantillon d'acide nucléique sur la base de cette détection. L'invention concerne enfin des procédés permettant d'analyser de multiple analytes dans un échantillon, ainsi que des trousses conçues pour caractériser les échantillons d'analytes.

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