Anti-neutrophil cytoplasmic antibody material associated...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/13 (2006.01) C07K 1/22 (2006.01) C07K 14/47 (2006.01) C07K 16/18 (2006.01) C07K 16/42 (2006.01) C12N 7/01 (2006.01) G01N 33/564 (2006.01) G01N 33/569 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01)

Patent

CA 2223439

For the first time, the present invention provides isolated, substantially pure, and/or recombinantly produced pANCA associated with ulcerative colitis (UCpANCA and UCpANCA material) as well as polynucleotides encoding the UCpANCA, UCpANCA material and UCpANCA polypeptides of the present invention. Using the phage display technique, immunoglobulin gene repertoires biased for the immunoglobulin genes utilized by pANCA seropositive UC patients have been isolated, amplified, randomly re-combined to generate phagemid expression vector libraries encoding DNA homologs of the gene repertoire. Methods are provided for enriching these libraries to create libraries of VH- and VL- encoding DNA homologs having immunoreactivity of UCpANCA antigen. Also provided are methods of screening the libraries of the present invention for UCpANCA and UCpANCA material. These libraries may be encapsulated in phage particles or in cells. Methods and kits are also provided for screening for UCpANCA in a sample and isolating UCpANCA antigen.

Il est fourni, pour la première fois, au titre de cette invention, un pANCA (anticorps cytoplasmique anti-neutrophile) isolé, quasiment pur et/ou produit par recombinaison, associé à la rectocolite hémorragique (UCpANCA et matériel UCpANCA) ainsi que des polynucléotides codant l'UCpANCA, du matériel UCpANCA et des polypeptides selon l'invention de l'UCpANCA. On a isolé, en faisant appel à la technique de présentation des virus bactériens, des répertoires d'un gène pour immunoglobuline orientés vers des gènes pour immunoglobuline utilisés chez des patients atteints de rectocolite hémorragique ayant une réponse positive à des tests de présence de l'ANCA dans le sang; ces répertoires ont été amplifiés et recombinés de manière aléatoire afin de produire des librairies de vecteur d'expression de phagémide codant des homologues d'ADN du répertoire génique. Cette invention, qui présente des procédés permettant d'enrichir ces librairies de façon à créer des librairies de V¿H?- et V¿L?- codant des homologues d'ADN présentant une immunoréactivité à un antigène de l'UCpANCA, concerne également des procédés de criblage des librairies selon l'invention pour l'UCpANCA et du matériel UCpANCA. Ces librairies peuvent être encapsulées dans des virus bactériens ou dans des cellules. Cette invention porte également sur des procédés et des kits de criblage de l'UCpANCA dans un échantillon et d'isolation d'antigène de l'UCpANCA.

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