C - Chemistry – Metallurgy – 07 – K
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
07
K
C07K 16/18 (2006.01) C07K 1/22 (2006.01) C07K 14/47 (2006.01) G01N 33/536 (2006.01) G01N 33/543 (2006.01) G01N 33/577 (2006.01) G01N 33/92 (2006.01)
Patent
CA 2194163
Compositions and methods using antibodies which are immunoreactive with specific apolipoproteins to determine the concentrations of lipoproteins such as HDL and LDL, and/or apolipoproteins in human blood, serum or plasma sample, are described. Monoclonal antibodies (MAbs) are described that specifically bind to epitopes present in apolipoproteins and lipoproteins, enabling rapid and reliable determinations of levels of specific blood lipoprotein and/or apolipoprotein levels, including Apo B-100, Apo A-I, Apo A-II, Apo C-III, and Apo E, and thereby determination of relative ratios of HDL and LDL and LpaI and LpaII. In a preferred embodiment, the compositions are strips of a solid phase material coated with one or more of the antibodies and are referred to herein as "dipsticks". The dipsticks specifically bind a lipoprotein or apolipoprotein when dipped into a protein sample. The amount of lipid associated with a bound lipoprotein or the amount of apolipoprotein bound on the dipstick is quantitated using an appropriate method, for example, by staining with a lipid stain or reaction wth a second labelled antibody. The intensity of the stain on the dipstick is proportional to the concentration of the lipoprotein lipid or apolipoprotein circulating in the blood and can be quantitated by comparison with standards containing konwn amounts of lipid.
L'invention concerne des procédés et des compositions associées procédés selon lesquels des anticorps réagissant immunologiquement avec des apolipoprotéines spécifiques sont utilisés pour déterminer les concentrations de lipoprotéines telles que les lipoprotéines de haute et faible densité et/ou les apolipoprotéines, dans un échantillon de sang, de sérum ou de plasma humains. L'invention concerne des anticorps monoclonaux (Mabs) se fixant spécifiquement aux épitopes présents dans les apolipoprotéines et les lipoprotéines, qui permettent donc des déterminations fiables et rapides des niveaux de lipoprotéines spécifiques, et/ou d'apolipoprotéines dans le sang, dont Apo B-100, Apo A-I, Apo A-II, Apo C-III et Apo E, et donc la détermination des taux relatifs de lipoprotéines de faible et haute densité et de LpaI et LpaII. Dans un mode de réalisation préféré, les compositions sont des bandes de matériau en phase solide enrobés d'un ou plusieurs desdits anticorps et sont appelées ici bandelettes réactives. Ces bandelettes réactives fixent spécifiquement une lipoprotéine ou une apolipoprotéine lorsqu'elles sont immergées dans un échantillon protéique. Le volume de lipide associé à une lipoprotéine fixée ou le volume d'apolipoprotéine fixée à la bandelette réactive est quantifié selon un procédé approprié, par exemple par coloration à l'aide d'un colorant lipidique ou par mise en réaction avec un second anticorps marqué. L'intensité de la coloration sur la bandelette réactive est proportionnelle à la concentration de lipide lipoprotéique ou d'apolipoprotéine circulant dans le sang et peut être quantifiée par comparaison avec des étalons contenant des volumes lipidiques connus.
Koren Eugen
Koscec Mirna
Bereskin & Parr
Oklahoma Medical Research Foundation
LandOfFree
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