G - Physics – 01 – N
Patent
G - Physics
01
N
G01N 33/532 (2006.01) G01N 33/52 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01) G01N 33/58 (2006.01)
Patent
CA 2462280
The present invention provides labeling reagents and methods for labeling primary antibodies and for detecting a target in a sample using an immuno- labeled complex that comprises a target-binding antibody and one or more labeling reagents. The labeling reagents comprise monovalent antibody fragments or non-antibody monomeric proteins whereby the labeling proteins have affinity for a specific region of the target-binding antibody and are covalently attached to a label. Typically, the labeling reagent is an anti-Fc Fab or Fab' fragment that was generated by immunizing a goat or rabbit with the Fc fragment of an antibody. The present invention provides for discrete subsets of labeling reagent and immuno-labeled complexes that facilitate the simultaneous detection of multiple targets in a sample wherein the immuno- labeled complexes are distinguished by i) a ratio of label to labeling reagent, or ii) a physical property of said label, or iii) a ratio of labeling reagent to said target-binding antibody, or iv) by said target-binding antibody. This is particularly useful for fluorophore labels that can be attached to labeling reagents and subsequently immuno-labeled complexes in ratios for the detection of multiple targets.
L'invention porte sur des réactifs de marquage et des procédés de marquage d'anticorps primaires et de détection de cibles dans un échantillon à l'aide d'un complexe immuno-marqué comprenant un anticorps se fixant à la cible et un ou plusieurs réactifs de marquage. Lesdits réactifs comprennent des fragments d'anticorps monovalents et des protéines monomères non anticorps, les protéines de marquage présentant une affinité pour une région spécifique de l'anticorps se fixant à la cible, et étant liées par covalence à un marqueur. Normalement le réactif de marquage est un fragment anti-Fc Fab ou Fab' obtenu par immunisation d'une chèvre ou un lapin avec un fragment Fc d'anticorps. L'invention porte également sur des sous-ensembles discrets de réactifs de marquage et de complexes immuno-marqués facilitant la détection simultanée de plusieurs cibles dans un échantillon. Les complexes immuno-marqués se distinguent par: i) le rapport marqueur/réactif de marquage; ou ii) une propriété physique dudit marqueur; ou iii) le rapport du réactif de marquage audit anticorps de fixation de la cible; ou iv) par ledit anticorps de fixation de la cible. Cela est particulièrement utile pour les marqueurs de fluorophore se fixant à des réactifs de marquage et en conséquence pour les complexes immuno-marqués dans des rapports de détection de cibles multiples.
Archer Robert M.
Beechem Joseph M.
Hagen David C.
Haugland Richard P.
Haugland Rosaria P.
Mbm Intellectual Property Law Llp
Molecular Probes Inc.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-2037011