Apoptosis methods, genes and proteins

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 1/19 (2006.01) A61K 31/7105 (2006.01) A61K 38/17 (2006.01) A61K 39/395 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01) C12N 5/00 (2006.01) C12N 15/81 (2006.01) C12Q 1/02 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) C40B 30/00 (2006.01) C40B 50/06 (2006.01) C07K 14/47 (2006.01) C07K 14/705 (2006.01) C12N 9/02 (2006.01) C12N 9/10 (2006.01) C12N 15/12 (2006.01) C12N 15/52 (2006.01) C12N 15/54 (2006.01)

Patent

CA 2642856

A W303a Saccharomyces cerevisiae yeast cell which contains a polynucleotide that encodes a functional Bax polypeptide under the control of a galactose- inducible promoter that is integrated at the LEU2 chromosomal locus. A kit of parts comprising the yeast cells and a yeast plasmid vector suitable for transforming a cDNA library into the yeast cells. Use of the yeast cell for screening a cDNA library for a polynucleotide that is or encodes an inhibitor of B ax-mediated apoptosis. Genes and polypeptides that inhibit Bax-mediated apoptosis and which were identified from a human hippocampus cDNA library screened in the yeast cells. A method of combating Bax-mediated apoptosis in a cell using an inhibitor of Bax-mediated apoptosis which was identified from a human hippocampus cDNA library screened in the yeast cells. A method of promoting Bax-mediated apoptosis in a cell using an inhibitor or antagonist of the anti-apoptotic polypeptides identified from a human hippocampus cDNA library screened in the yeast cells.

La présente invention concerne une cellule de levure Saccharomyces cerevisiae W303a contenant un polynucléotide codant pour un polypeptide fonctionnel Bax sous le contrôle d'un promoteur inductible par le galactose qui est intégré au locus chromosomique LEU2. L'invention a également trait à une trousse de parties comportant les cellules de levure et un vecteur plasmidique de levure apte à la transformation d'une banque d'ADNc en cellules de levure. L'invention concerne en outre l'utilisation de la cellule de levure pour le criblage d'une banque d'ADNc pour un polynucléotide qui est ou code pour un inhibiteur de l'apoptose médiée par Bax. L'invention concerne également des gènes et des polypeptides inhibiteurs de l'apoptose médiée par Bax et qui ont été identifiés à partir d'un hippocampe humain. Par ailleurs, l'invention concerne un procédé de lutte contre l'apoptose médiée par Bax dans une cellule mettant en oeuvre un inhibiteur de l'apoptose médiée par Bax qui a été identifié à partir d'une banque d'ADNc d'hippocampes humains criblée dans des cellules de levure. Enfin l'invention concerne un procédé de stimulation de l'apoptose médiée par Bax dans une cellule mettant en oeuvre un inhibiteur ou antagoniste des polypeptides anti-apoptose identifiés à partir d'une banque d'ADNc criblée dans des cellules de levure.

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