C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01)
Patent
CA 2270902
Disclosed is a method of detecting the presence of a nucleic acid target sequence of interest in a sample, comprising the steps of: (a) reacting the sample containing the target sequence of interest with a first nucleic acid probe, so as to cause hybridisation between complementary portions of the target and the probe, wherein the first probe comprises 5' and 3' portions complementary to respective, substantially adjacent portions of the target sequence and an intervening non-complementary portion which does not become hybridised to the target, thereby creating a loop region looped out from a complex formed between the first probe and the target, such that non- contiguous portions of the first probe are brought into close proximity; (b) hybridising a second nucleic acid probe to the non-contiguous portions of the first probe; (c) initiating nucleic acid synthesis, using the first probe as template, in a manner dependent upon hybridisation of the second probe to the first probe; and (d) detecting the newly synthesised nucleic acid from step (c) above. Also disclosed are kits for performing the method of the invention.
L'invention concerne une méthode de détection d'une séquence cible d'acide nucléique intéressante dans un échantillon, la méthode consistant: (a) à mettre en réaction l'échantillon qui contient la séquence cible intéressante avec une première sonde d'acide nucléique, afin de provoquer une hybridation entre des parties complémentaires de la cible et de la sonde, la première sonde comprenant des parties 5' et 3' complémentaires de parties respectives de la séquence cible, essentiellement contiguës, et une partie non complémentaire interposée qui ne devient pas hybridée à la cible; ainsi, une région de boucle se crée, sortant en boucle à partir d'un complexe formé entre la première sonde et la cible, de sorte que des parties non contiguës de la première sonde se trouvent à proximité immédiate; (b) à hybrider une deuxième sonde d'acide nucléique aux parties non contiguës de la première sonde; (c) à initier une synthèse d'acide nucléique, en utilisant la première sonde comme matrice, d'une manière dépendant de l'hybridation de la deuxième sonde à la première sonde; et (d) à détecter l'acide nucléique nouvellement synthétisé à partir de l'étape (c) précédente. L'invention concerne également des trousses permettant de mettre en oeuvre la méthode de l'invention.
British Biocell International Limited
Cytocell Limited
Kirby Eades Gale Baker
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1626560