G - Physics – 01 – N
Patent
G - Physics
01
N
G01N 33/543 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01)
Patent
CA 2439404
A method and kit for simultaneous detection and/or determination of a plurality of modified proteins in a sample. The method comprises: a) contacting the sample under mild protein denaturation conditions with a plurality of first antibodies capable of binding to a specific target protein, the first antibodies being immobilized on solid support material, each first antibody being differentiable from others by a differentiation parameter, whereby the first antibodies bind to respective target proteins present in the sample; b) removing unbound materials from the locus of the first antibodies; c) contacting the materials from step (b) with one or more second antibodies, each of which is specific to a class or subclass of modified proteins or with a plurality of second antibodies, each of which is specific to a modified protein, so as to bind the second antibody or antibodies to modified proteins in the sample; and d) detecting and/or determining a plurality of modified proteins in the sample.
L'invention concerne un procédé et une trousse de détection et/ou de détermination simultanée, dans un échantillon, de plusieurs protéines modifiées. Le procédé consiste a) à mettre en contact l'échantillon dans des conditions douces de dénaturation de protéines avec plusieurs premiers anticorps capables de se lier à une protéine cible spécifique, ces premiers anticorps étant immobilisés sur un matériau de support solide, un paramètre de différentiation permettant de différencier chaque premier anticorps des autres; les premiers anticorps se lient à des protéines cibles correspondantes présentes dans l'échantillon; b) à évacuer les matériaux non liés du locus des premiers anticorps; c) à mettre en contact les matériaux de b) avec un ou plusieurs seconds anticorps, chacun étant spécifique à une classe ou sous-classe de protéines modifiées, ou avec plusieurs seconds anticorps, chacun spécifique à une protéine modifiée, de façon à lier le(les) second(s) anticorps à des protéines modifiées dans l'échantillon; et d) à détecter et/ou à déterminer plusieurs protéines modifiées dans l'échantillon.
Nguyen Quan
Song Yong
Bio-Rad Laboratories Inc.
Fetherstonhaugh & Co.
LandOfFree
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