C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/04 (2006.01) C12Q 1/06 (2006.01) C07K 14/00 (2006.01) C12P 21/00 (2006.01)
Patent
CA 2267655
An assay is provided for determining the presence of contaminating microbial host cells in a culturing vessel containing a microbial host cell strain that utilizes more than one carbohydrate source as a substrate comprising: (a) culturing the microbial host cell strain in the vessel, wherein the strain comprises nucleic acid encoding a polypeptide of interest and is genetically marked so as not to utilize a carbohydrate source as a substrate; (b) plating an isolated sample of culture from step (a) onto culture media supplemented with a carbohydrate source not utilized by the host cell strain as a substrate; (c) incubating the plated cells at a temperature and for a time sufficient for any positive colony to grow to a detectable level; and (d) detecting whether any colonies are growing on the supplemented culture media.
La présente invention concerne une analyse permettant de déterminer la présence de cellules hôtes microbiennes contaminantes dans un récipient de culture contenant une souche de cellules hôtes microbiennes utilisant comme substrat plusieurs sources de glucides. L'analyse consiste (a) à cultiver la souche de cellules hôtes microbiennes dans le récipient, laquelle comporte un acide nucléique codant un polypeptide considéré et est génétiquement marquée de façon à ne pas utiliser une source de glucides comme substrat; (b) à déposer un échantillon isolé de la culture provenant de l'étape (a) sur un milieu de culture supplémenté par une source de glucides n'ayant pas été utilisée comme substrat par la souche de cellules hôtes; (c) à faire incuber les cellules déposées dans des conditions de température et de durée suffisantes pour obtenir la croissance d'une colonie positive à un niveau détectable; et (d) à détecter l'existence éventuelle de colonies en cours de croissance dans le milieu de culture supplémenté.
Mcfarland Nancy C.
Swartz James R.
Dennison Associates
Genentech Inc.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1372326