Assays for bacterial detection and identification

Details Assays for bacterial detection and identification Assays for bacterial detection and identification

G - Physics

01

N

G01N 33/569 (2006.01) C07K 16/12 (2006.01) C07K 16/18 (2006.01) C12N 9/52 (2006.01)

Patent

CA 2757100

The invention herein generally relates to kits and methods for detecting the presence of a bacterium in a subject, for example, methicillin resistant S. aureus. In certain embodiments, the invention provides a method of detecting presence of a bacterium in a sample from a subject, the method including: contacting a sample from a subject with a bacterium-specific lytic enzyme or lysostaphin capable of specific lysis of a first bacterium if present in the sample, thereby exposing an intracellular gene or gene product of the first bacterium; contacting the sample with a particle having a protein on a surface of the particle in a presence of an antibody in which an Fc portion specifically binds the protein and an F(ab)2 portion specifically binds the intracellular gene or gene product of the first bacterium, with the proviso that when the particle is a second bacterium, the second bacterium is different from the first bacterium; and detecting the presence or absence of the first bacterium by observing the sample for an agglutination reaction, wherein agglutination indicates the presence of the first bacterium in the sample.

La présente invention concerne, de façon générale, des nécessaires et des procédés de détection de la présence d'une bactérie chez un sujet, par exemple celle du staphylocoque doré résistant à la méthicilline. Dans certains modes de réalisation, l'invention concerne un procédé de détection de la présence d'une bactérie dans un échantillon prélevé chez un sujet, ledit procédé comprenant la mise en contact d'un échantillon prélevé chez un sujet avec une enzyme lytique spécifique de la bactérie ou une lysostaphine se révélant capable de lyser, de façon spécifique, une première bactérie si celle-ci est présente dans l'échantillon, ce qui a pour effet de mettre à nu un produit génique ou un gène intracellulaire de ladite première bactérie ; la mise en contact de l'échantillon avec une particule comportant une protéine à sa surface en présence d'un anticorps dans lequel une partie Fc lie, de façon spécifique, la protéine, tandis qu'une partie F(ab)2 lie, de façon spécifique, le produit génique ou le gène intracellulaire de la première bactérie, sous réserve que lorsque la particule correspond à une seconde bactérie, la seconde bactérie soit différente de la première bactérie ; et à détecter la présence ou l'absence de la première bactérie en recherchant, dans l'échantillon, une réaction d'agglutination, ladite agglutination indiquant la présence de ladite première bactérie dans l'échantillon.

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