Axial pattern analysis and sorting instrument for...

G - Physics – 01 – N

Patent

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G01N 15/14 (2006.01)

Patent

CA 2355709

An improved instrument that consists of an optical analyser and a fluid switch using light scatter and fluorescence means to optically identify and activate fluidic sorting of multicellular organisms from live populations of organisms such as various life cycle stages of <i>Caenorhabditis elegans</i>, the larval stages of <i>Drosophila melanogaster</i>, and the embryonic stages of <i>Danio rero</i>. In the case where fluorescence from these organisms is very weak, comparatively high levels of electronic noise accompany the electronic signals that are generated by the fluorescence detector and its associated circuitry. Because these weak signals cannot be used to mark the presence of an organism, another, less noisy, signal must be used to gate fluorescence detection. A gate derived from the low-noise light scatter signal from the organism collected over an acceptance angle of at least 20 degrees. Such a light scatter signal unambiguously gates even weak fluorescence signals. These signals can then be correlated with position along the major axis of elongate, multicellular organisms and used as enhanced analysis and sorting parameters.

L'invention concerne un instrument perfectionné, comprenant un analyseur optique et un commutateur fluidique utilisant des organes de fluorescence et de dispersion lumineuse, afin d'identifier optiquement et d'activer le triage fluidique d'organismes multicellulaires provenant de populations vivantes, telles que des <i>Caenorhabditis elegans</i> à différents stades de durée de vie, des <i>Drosophila melanogaster</i>, à différents stades larvaires et des <i>Danio rero)</i> à différents stades embryonnaires. Dans le cas où ces organismes présentent une fluorescence très faible, des niveaux comparativement élevés de bruit électronique accompagnent les signaux électriques produits par le détecteur de fluorescence et son circuit associé. Du fait de leur faiblesse, ces signaux ne peuvent être utilisés pour marquer la présence d'un organisme, un autre signal moins bruyant devant être utilisé pour détecter la fluorescence de grille. L'invention concerne également une grille dérivée d'un signal de dispersion lumineuse de faible bruit, issu d'un organisme collecté sur un angle d'admission d'au moins 20 degrés. Ce signal de dispersion lumineuse sélectionne, de manière non ambiguë, même des signaux à faible fluorescence. Ces signaux peuvent être corrélés avec une position située le long de l'axe principal des organismes multicellulaires allongés, et sont utilisés comme paramètres de tri et d'analyse améliorés.

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