Bacterial leader sequences for increased expression

Details Bacterial leader sequences for increased expression Bacterial leader sequences for increased expression

C - Chemistry, Metallurgy

12

N

C12N 15/62 (2006.01)

Patent

CA 2677179

Compositions and methods for improving expression and/or secretion of protein or polypeptide of interest in a host cell are provided. Compositions comprising a coding sequence for a bacterial secretion signal peptide are provided. The coding sequences can be used in vector constructs or expression systems for transformation and expression of a protein or polypeptide of interest in a host cell. The compositions of the invention are useful for increasing accumulation of properly processed proteins in the periplasmic space of a host cell, or for increasing secretion of properly processed proteins from the host cell. In particular, the secretion signal peptides comprise a protein disulfide isomerase C (dsbC), a mutant phosphate binding protein (pbp*), a protein disulfide isomerase A (dsbA), a CupA2, a CupB2,. a CupC2, a NikA, a FIgI, a tetratricopeptide repeat family protein (ORF5550), a toluene tolerance protein (Ttg2C), or a methyl accepting chemotaxis protein (ORF8124) secretion signal.

L'invention concerne des compositions et des procédés pour améliorer l'expression et/ou la sécrétion d'une protéine ou d'un polypeptide d'intérêt dans une cellule hôte. Elle concerne des compositions comprenant une séquence codant un peptide signal de sécrétion bactérien. La séquence codante peut être utilisée dans des constructions de vecteur ou dans des systèmes d'expression destinés à la transformation et à l'expression d'une protéine ou d'un polypeptide d'intérêt dans une cellule hôte. Les compositions de l'invention sont utiles pour augmenter l'accumulation de protéines dont la maturation est correcte dans l'espace périplasmique d'une cellule hôte, ou pour augmenter la sécrétion par la cellule hôte de protéines dont la maturation est correcte. En particulier, l'invention concerne des molécules d'acide nucléique codant des peptides signal de sécrétion isolées. De surcroît, des séquences d'acides aminés correspondant aux molécules d'acide nucléique sont comprises dans l'invention. En particulier, la présente invention concerne les molécules d'acide nucléique isolées comprenant les séquences nucléotidiques codant les séquences d'acides aminés présentées dans SEQ ID NO:2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, et 24, et les séquences nucléotidiques présentées dans SEQ ID NO: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 21, et 23, ainsi que leurs variants et fragments.

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