.beta.-galactoside .alpha.-2,6-sialyltransferase

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 9/10 (2006.01)

Patent

CA 2252561

.beta.-Galactoside .alpha.-2,6-sialyltransferase produced by the genetic engineering technique. The enzyme may be deficient in at least a part of the membrane binding region possessed by a naturally occurring .beta.-galactoside .alpha.-2,6-sialyltransferase and hence, when expressed in a host, is likely to be secreted outside cells, so that it can be easily prepared and purified. It is prepared by culturing a host cell transformed with an expression vector containing a DNA encoding the amino acid sequence of 16-498 in SEQ ID NO: 1 or DNA encoding a protein which has the same amino acid sequence as the above one, except that one or more amino acids have been deleted, substituted or added, and has a .beta.-galactoside .alpha.-2,6-sialyltransferase activity under such conditions as will accelerate the expression of the .beta.- galactoside .alpha.-2,6sialyltransferase, and recovering a .beta.-galactoside .alpha.-2,6-sialyltransferase protein from the culture.

.beta.-galactoside .alpha.-2,6-sialyltransférase produite par une technique de manipulation génétique. Ladite enzyme peut être déficiente dans au moins une partie de la région de fixation à la membrane d'une .beta.-galactoside .alpha.-2,6-sialyltransférase apparaissant naturellement et donc, lorsqu'elle est exprimée dans un hôte, elle est susceptible d'être sécrétée à l'extérieur des cellules de sorte qu'elle soit facile à préparer et à purifier. On la prépare en mettant en culture une cellule hôte transformée au moyen d'un vecteur d'expression contenant un ADN codant la séquence d'acides aminés de 16-498 dans SEQ ID NO: 1 ou un ADN codant une protéine ayant la même séquence d'acides aminés que la précédente, sauf qu'un ou plusieurs acides aminés ont été supprimés, substitués ou ajoutés et qu'elle présente une activité de .beta.-galactoside .alpha.-2,6-sialyltransférase dans des conditions qui accélèrent l'expression de cette dernière, et en récupérant une protéine .beta.-galactoside .alpha.-2,6-sialyltransférase dans la culture.

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Profile ID: LFCA-PAI-O-2009109

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