C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/62 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 9/78 (2006.01) C12N 15/55 (2006.01) C12N 15/65 (2006.01) C12N 15/86 (2006.01) C12N 15/867 (2006.01)
Patent
CA 2163427
The invention provides selectable fusion genes including a dominant positive selectable gene fused to and in reading frame with a negative selectable gene. The selectable fusion gene encodes a single bifunctional fusion protein which is capable of conferring a dominant positive selectable phenotype and a negative selectable phenotype on a cellular host. A dominant negative selectable phenotype is conferred by the cytosine deaminase (CD) gene for 5-fluorocytosine sensitivity (5-FCs). A dominant positive selectable phenotype is conferred, for example, by the neo gene for G-418 aminoglycoside antibiotic resistance (G-418r), or by the hph gene for hygromycin B resistance (Hmr). The present invention also provides recombinant expression vectors, such as retroviral vectors, which include selectable fusion genes, and cells transduced with the recombinant expression vectors. The bifunctional selectable fusion genes are expressed and regulated as a single genetic entity, permitting co-regulation and co-expression with a high degree of efficiency.
L'invention concerne des gènes de fusion sélectables comprenant un gène dominant, positif et sélectable fusionné à un gène sélectable négatif et en phase de lecture avec ce dernier. Le gène de fusion sélectable code une protéine de fusion unique bifonctionnelle capable d'attribuer un phénotype dominant, positif et sélectable et un phénotype négatif sélectable à une cellule hôte. Un phénotype dominant, négatif et sélectable est attribué par le gène de cytosine-déaminase (CD) de la sensibilité à 5-fluorocytosine (5-FC<s>). Un phénotype dominant, positif et sélectable est attribué, par exemple, par le gène neo pour la résistance à l'antibiotique d'aminoglycoside de G-418 (G-418<r>) ou par le gène hph pour la résistance à l'hygromycine B (Hm<r>). L'invention concerne également des vecteurs d'expression recombinants, tels que des vecteurs de rétrovirus, comprenant des gènes de fusion sélectables, ainsi que des cellules soumises à une transduction avec les vecteurs d'expression recombinants. Les gènes de fusion sélectables et bifonctionnels sont exprimés et régulés en tant qu'entité génétique unique, ce qui permet la co-régulation et la co-expression avec un degré d'efficacité élevé.
Borden Ladner Gervais Llp
Targeted Genetics Corporation
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1460328