C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/34 (2006.01) C07K 14/01 (2006.01) C12N 15/82 (2006.01)
Patent
CA 2304984
This invention relates to a regulated binary plant viral expression system. It is comprised of two chromosomally-integrated components. One component is a proreplicon, which contains cis-acting viral sequences required for replication and a contains a target gene. The other component is a chimeric trans-acting replication gene comprising a regulated promoter operably-linked to the coding region for a viral replication protein. The proreplicon lacks the replication gene essential for replicon replication, and thus cannot undergo autonomous episomal replication. However, regulated expression of the trans-acting replication protein in plant cells also containing the proreplicon will trigger the release of free replicon from the integrated proreplicon, result in its episomal replication in trans, and result in the expression of the target gene, if present, through gene amplification. The expression system is useful for both production of foreign proteins as well as silencing endogenous genes and transgenes in plant tissue. Tissue-specific expression is controlled by the choice of promoter controlling the transcription of the trans-acting replication gene.
L'invention concerne un système binaire d'expression virale régulée dans des plantes. Il est composé de deux éléments intégrés dans les chromosomes. Un élément est un proréplicon contenant des séquences virales à action cis nécessaires pour la réplication dont une séquence contient un gène ciblé. L'autre élément est un gène chimère de réplication à action trans comprenant un promoteur relié à la région codante pour la réplication de la protéine virale. Le proréplicon est exempt du gène de réplication essentiel pour la réplication du réplicon et, de ce fait, ne peut pas subir de réplication épisomique autonome. Cependant, l'expression régulée de la protéine de réplication à action trans dans des cellules de la plante contenant également le proréplicon déclenchera la libération d'un réplicon libre depuis le proréplicon intégré, ce qui produira sa réplication épisomique in trans, ainsi que l'expression du gène ciblé, s'il est présent, par l'intermédiaire de l'amplification génique. Ce système d'expression est utile à la fois pour la production de protéines étrangères et la mise en sommeil de gènes endogènes et de transgènes dans le tissu de la plante. L'expression spécifique au tissu est commandée par le choix du promoteur régulant la transcription du gène de réplication à action trans.
Bennett Jones Llp
E.i. Du Pont de Nemours And Company
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1881341