Bioassay for myostatin

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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Details

C12Q 1/68 (2006.01) C12Q 1/00 (2006.01) C12Q 1/66 (2006.01) G01N 33/50 (2006.01) C12N 15/85 (2006.01)

Patent

CA 2453189

The present invention relates to a bioassay for determining the amount of active myostatin present in an animal or part thereof comprising of steps (a) amplifying the myostatin promoter, or a functional fragment or variant thereof; (b) cloning the promoter into a reporter vector or construct; (c) transfecting the vector into a myogenic precursor cell line (myoblasts) and selecting transfected myoblasts; (d) incubating transfected myoblasts with myostatin, serum or muscle extracts taken from animal of interest; (e) washing the myoblasts and preparing protein extracts therefrom; (h) performing a reporter gene assay on the protein extracts.

La présente invention concerne un titrage biologique permettant de déterminer la quantité de myostatine active présente chez un animal ou dans une partie dudit animal. L'invention consiste à (a) amplifier le promoteur de myostatine, ou un fragment ou un variant fonctionnel dudit promoteur; (b) cloner le promoteur en un vecteur ou en une construction de rapporteur; (c) transfecter le vecteur en une lignée cellulaire de précurseur myogénique (myoblastes) et sélectionner les myoblastes transfectés; (d) incuber les myoblastes transfectés à l'aide de myostatine, de sérum ou d'extraits de muscle prélevés à partir d'animaux à étudier; (e) laver les myoblastes et préparer des extraits de protéines desdits myoblastes; (h) réaliser un titrage par gène rapporteur sur les extraits de protéines.

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