G - Physics – 01 – N
Patent
G - Physics
01
N
G01N 27/447 (2006.01)
Patent
CA 2315051
The present method generally comprises mixing a pro-selected, detectable target with a sample of complex biological material to produce a first, sample/target mixture capillary electrophoresis apparatus. Subsequently, the first mixture is mixed with a pre-selected, tight-binding competitive ligand (TBCL), prior to produce a second, sample/target/TBCL mixture, for a predetermined optimal incubation period sufficient to allow the TBCL to bind a pro-selected percentage of the available target in the absence of any other ligand. An aliquot of the second mixture is subsequently subjected to pre-optimized capillary electrophoresis, during which the migration of the target is monitored. The presence of a potential new compound is indicated by the increase in the peak area of the unbound target peak and/or decrease in the peak area of the TBCL/target complex peak. A capillary electrophoretic profile of the second mixture is produced, which may be compared to a reference standard. The reference standared typically comprises a capillary electrophoretic profile or migration pattern of the target when mixed with a TBCL in an absence of any other competing ligand under similar, preselected capillary electrophoretic conditions.
L'invention consiste, en général, à mélanger une cible détectable préselectionnée à un échantillon de matière biologique complexe de manière à produire un appareil d'électrophorèse capillaire du premier mélange échantillon/cible. Le premier mélange est ensuite mélangé à un ligand compétitif à liaison renforcée (TBCL) présélectionné, de manière à produire un second mélange, constitué de l'échantillon, de la cible et du TBCL. Ce dernier mélange est laissé en incubation pour une période d'incubation optimale prédéterminée suffisante pour permettre au TBCL de se lier, à raison d'un pourcentage préselectionné, à la cible disponible en l'absence de tout autre ligand. Une aliquote du second mélange est ensuite soumise à une électrophorèse capillaire pré-optimisée, pendant laquelle la migration de la cible est surveillée. La présence d'un nouveau composé potentiel est indiquée par l'augmentation de la surface du pic cible libre et/ou la diminution de la surface du pic du complexe TBCL/cible. Un profil d'électrophorèse capillaire du second mélange pouvant être comparé à une référence type est produit. Cette référence type comprend typiquement un profil d'électrophorèse capillaire ou un schéma de migration de la cible lorsqu'elle est mélangée à un TBCL en l'absence de tout autre ligand compétitif dans des conditions d'électrophorèse capillaire préselectionnées et similaires.
Dunayevskiy Yuriy M.
Hughes Dallas E.
Waters James L.
Cetek Corporation
Ridout & Maybee Llp
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1573614