C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01) G01N 33/543 (2006.01)
Patent
CA 2548985
Methods for conducting an assay to detect nucleic acid hybridization are disclosed. In particular, the fabrication of a carbon electrode suited to nucleic acid hybridization detection is described. In some preferred embodiments, a micro array of carbon electrodes is constructed using photolithography. The final step in the photolithography process involves developing a solder mask 306 with an alkaline solution. The alkaline solution oxidizes the carbon surface 304 producing surface carboxylic acid groups. The surface carboxylic acid groups are reacted with EDC or DCC and NHS to produce NHS esters. Immobilization of NeutrAvidinTM onto the electrode surface is effected by reaction with the surface NHS ester groups. A biotinylated probe DNA molecule is then attached to the electrode via binding between the biotin group and the immobilized NeutrAvidinTM. The resulting electrode can be used to detect hybridization between the probe DNA and complementary target DNA.
L'invention concerne des procédés pour réaliser une analyse pour détecter une hybridation d'acide nucléique. Cette invention concerne en particulier la production d'une électrode de carbone conçue pour détecter une hybridation d'acide nucléique. Dans certains modes de réalisation préférés de l'invention, un microréseau d'électrodes de carbone est produit par photolithographie. La dernière étape du processus de photolithographie consiste à développer un masque de soudure (306) au moyen d'une solution alcaline. Cette solution alcaline oxyde la surface de carbone (304), de manière à produire des groupes d'acide carboxylique de surface. On fait réagir ces groupes d'acide carboxylique de surface avec les composants EDC ou DCC et NHS pour produire des esters NHS. Le produit NeutrAvidin<SP>TM</SP> est immobilisé sur la surface de l'électrode, par réaction avec les groupes esters NHS de surface. Une sonde biotinylée à base de molécule d'ADN est ensuite fixée sur l'électrode, par liaison entre le groupe biotine et le produit NeutrAvidin<SP>TM</SP> immobilisé. L'électrode résultante peut être utilisée pour détecter une hybridation entre la sonde d'ADN et l'ADN complémentaire cible.
Chen Ting
Holmlin R. Erik
Yang Xing
Borden Ladner Gervais Llp
Geneohm Sciences Inc.
LandOfFree
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