Cassette for the transformation of yeast

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 1/19 (2006.01) C12N 15/11 (2006.01) C12N 15/81 (2006.01)

Patent

CA 2285041

The present invention relates to a DNA cassette intended for the transformation of yeast, leaving no useless exogenous DNA but the gene(s) of interest comprising at least one negative dominant marker, two direct repeat sequences (DRS) which are non exogenous and non recombinogenic with the genome of the host strain, these two direct repeat sequences flanking the negative dominant marker and optionally at least one gene of interest containing, if necessary, the elements necessary for its expression in the host cell. The invention relates as well to a method of integration of gene(s) of interest or inactivation of a gene in yeast, and of transformation of yeast with the DNA cassette, and to yeast strains thus obtained.

La présente invention a pour objet une cassette d'ADN destinée à la transformation des levures de manière à ne laisser dans la levure aucun ADN exogène autre que le ou les gènes d'intérêt comportant au moins un marqueur dominant négatif, deux séquences répétées directes (SRD) non exogènes et non recombinogéniques avec le génome de la souche hôte, ces 2 séquences répétées directes étant disposées de part et d'autre du fragment contenant le marqueur dominant négatif et éventuellement au moins un gène d'intérêt, avec, si besoin, les éléments nécessaires à son expression dans la cellule hôte. L'invention concerne également un procédé d'intégration de gène(s) d'intérêt ou d'inactivation d'un gène dans une levure et de transformation d'une levure avec la cassette d'ADN, ainsi que les souches de levures ainsi obtenues.

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