C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 9/42 (2006.01)
Patent
CA 2655478
An inactive xylanase molecule for the recovery of xylanase activity in plant- derived material containing active xylanase enzyme(s) and xylanase inhibitors. The inactive xylanase molecule of binds to xylanase inhibitors in the plant-derived material, thereby allowing accurate measurement of xylanase enzyme activity of the enzyme contained in the plant-derived material. The invention further includes amino acid molecules depicted by SEQ ID NOS. 4 through 112, wherein the catalytically active sites of each of the amino acids have been modified resulting in inactive xylanase molecules. A method of production of the inactive xylanase molecules includes expression of the inactive xylanase molecule in microbial or eukaryal (e.g., yeast including Pichia pastoris) host cell an expression cassette comprising a promoter operably linked to a nucleic acid molecule encoding the inactive xylanase molecule and using the expressed molecule in an assay to recover the xylanase enzyme activity in plant-derived material, for example, in plant-derived material such as animal feed.
L'invention concerne une molécule de xylanase inactive servant à extraire l'activité de xylanase dans un matériau d'origine végétale contenant une ou plusieurs enzymes xylanases actives et des inhibiteurs de xylanases. La molécule de xylanase inactive se lie aux inhibiteurs de xylanases dans le matériau d'origine végétale, ce qui permet de mesurer avec précision l'activité de xylanase de l'enzyme contenue dans ce matériau d'origine végétale. L'invention concerne en outre des molécules d'acides aminés, décrites par les SEQ ID N° 4 à 112, dans lesquelles les sites catalytiquement actifs de chacun des acides aminés ont été modifiés pour donner des molécules de xylanases inactives. Un procédé de production de ces molécules de xylanases inactives comprend l'expression de la molécule de xylanase inactive dans une cellule hôte microbienne ou eucaryote (par exemple des levures, parmi lesquelles Pichia pastoris). L'invention concerne en outre une cassette d'expression qui comprend un promoteur lié de manière opérante à une molécule d'acide nucléique codant pour la molécule de xylanase inactive, et l'utilisation de la molécule exprimée dans un essai d'extraction de l'activité enzymatique de la xylanase dans un matériau d'origine végétale, par exemple dans un matériau d'origine végétale tel qu'un aliment pour animaux.
Bauer Michael William
de Fontes Justin
Fetherstonhaugh & Co.
Syngenta Participations Ag
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-2009402