C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/70 (2006.01) C12Q 1/02 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) G01N 33/50 (2006.01) G01N 33/569 (2006.01)
Patent
CA 2435810
Cell fusion assays for identifying antiviral compounds are provided. In the cell fusion assays of the subject invention, a first cell that stably expresses on its surface an envelope protein of an enveloped virion and a second cell that stably expresses a receptor for the envelope protein on its surface are employed. The first and second cells each contain one component of a two component Tat reporter system that produces a detectable product in the presence of cell fusion. In practicing the subject screening methods, the first and second cells are first contacted with each other under cell fusion conditions in the presence of a candidate inhibitory agent. Next, the presence or absence of the detectable product is detected. Finally, the inhibitory activity of the candidate agent is derived from the presence or absence of the detectable product. Also provided are high throughput embodiments of the subject methods. In addition to the subject methods, systems and kits for performing the subject methods are provided.
La présente invention concerne des dosages de fusion cellulaire permettant d'identifier des composés antiviraux. Dans les dosages de la fusion cellulaire de cette invention, on utilise une première cellule qui exprime de manière stable sur sa surface une protéine enveloppe d'un virion enveloppé, et une seconde cellule qui exprime de manière stable sur sa surface un récepteur de la protéine d'enveloppe. Les première et seconde cellules contiennent respectivement un composé d'un système rapporteur Tat doté de deux composés, ledit système produisant un produit détectable en présence d'une fusion cellulaire. Lors de l'application des méthodes de criblage de cette invention, les première et seconde cellules sont d'abord mises en contact l'une avec l'autre dans des conditions de fusion cellulaire en présence d'un agent inhibiteur candidat. Puis, la présence ou l'absence du produit détectable est décelée. Enfin, l'activité inhibitrice de l'agent candidat est dérivée de la présence ou de l'absence du produit détectable. Cette invention concerne aussi des modes de réalisation à rendement élevé, ainsi que des méthodes, des systèmes, et des kits de réalisation desdites méthodes.
Goldsmith Mark A.
You Yun
Fetherstonhaugh & Co.
The J. David Gladstone Institutes
LandOfFree
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