Chaperonine-target protein complex, method of producing the...

C - Chemistry – Metallurgy – 07 – K

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C07K 19/00 (2006.01) A61K 38/16 (2006.01) C12N 15/62 (2006.01) C12P 21/02 (2006.01) C12P 21/08 (2006.01) G01N 33/48 (2006.01) G01N 33/566 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01)

Patent

CA 2522263

It is intended to provide a complex of chaperonine and a target protein by which the target protein can be handled more easily, and a method of producing the same; and a method of stabilizing the target protein, a method of immobilizing the target protein, a method of analyzing the structure of the target protein, a sustained-release agent and a method of producing an antibody against the target protein, each using the chaperonine-target protein complex. The above-described chaperonine-target protein complex contains a fused protein in which an affinity tag is attached to chaperonine subunits via a peptide bond, and a target protein to which the affinity tag shows a specific affinity. Owing to the specific affinity, the target protein is bonded to the affinity tag, thus forming a chaperonine ring structure consisting of a plural number of chaperonine subunits. Using to the chaperonine-target protein complex, the target protein can be stabilized and surely immobilized on a support without causing any change in its stereostructure.

La présente invention a trait à un complexe de chaperonine et d'une protéine cible grâce auquel une protéine cible peut être contrôlée plus facilement, et son procédé de production ; et à un procédé de stabilisation de la protéine cible, un procédé d'immobilisation de la protéine cible, un procédé d'analyse de la protéine cible, un agent de libération prolongée et un procédé de production d'un anticorps contre la protéine cible, tous mettant en oeuvre le complexe chaperonine/protéine cible. Le complexe chaperonine/protéine cible de l'invention contient une protéine fusionnée dans laquelle un marqueur d'affinité est fixé aux sous-unités de chaperonine par l'intermédiaire d'une liaison peptidique, et une protéine cible à laquelle le marqueur d'affinité présente une affinité spécifique. Grâce à l'affinité spécifique, la protéine cible se lie au marqueur d'affinité, formant ainsi une structure cyclique constituée d'une pluralité de sous-unités de chaperonine. A l'aide du complexe chaperonine/protéine cible, la protéine cible peut être stabilisée et immobilisée de manière fiable sur un support sans entraîner de modification dans sa stéréostructure.

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